本研究由Yanjun Li(中国农业科学院农业资源与农业区划研究所)、Ruirui Li、Ran Liu等共同完成,通讯作者为福建农林大学根生物学中心的Yongjia Zhong。研究成果发表于2025年6月的Journal of Integrative Plant Biology (JIPB),标题为《A simplified syncom based on core–helper strain interactions enhances symbiotic nitrogen fixation in soybean》(DOI: 10.1111/jipb.13881)。
研究领域:植物-微生物互作与合成微生物群落(Syncom, Synthetic Microbial Community)在可持续农业中的应用。
科学问题:传统合成微生物群落(Syncom)结构复杂且忽略菌株间互作,限制了其在农业中的应用效率。
研究动机:
1. 大豆(Glycine max)依赖与根瘤菌(Bradyrhizobium)的共生固氮(Symbiotic Nitrogen Fixation, SNF)获取氮素,但自然条件下固氮效率受微生物群落组成影响。
2. 此前Syncom构建多基于微生物与植物的潜在功能,而核心菌株(如根瘤菌)与辅助菌株(Helper Strains)的互作机制未被系统研究。
研究目标:开发一种基于核心-辅助菌株互作的简化功能型Syncom(SFSyncom),提高大豆共生固氮效率。
1. 核心菌株与辅助菌株筛选
- 研究对象:以大豆共生菌Bradyrhizobium elkanii BXYD3为核心菌株,测试其与3种预建Syncom(SC1–SC3)的共接种效果。
- 实验设计:
- 田间试验:大豆品种“Williams 82”和“Gui Xia No. 2”接种不同Syncom组合(SCx-B,x=1–3),测定生物量、氮含量及根瘤数(n=12)。
- 结果:SC1-B处理显著提高根瘤数量(+45%)、氮积累量(+32%)和产量(图1)。
2. 微生物群落结构分析
- 方法:16S rRNA基因测序(V5–V7区),比较根际细菌群落多样性(Shannon指数)和组成(OTU分析)。
- 发现:SC1-B处理显著富集Bradyrhizobium(相对丰度45.8%),且群落多样性低于其他处理(图2)。
3. 辅助菌株功能验证
- 关键菌株:从SC1中分离出Pantoea sp. NXR320和SDR495,验证其促进根瘤菌定殖的能力。
- 实验:
- 标记菌株:用GUS(β-葡萄糖醛酸酶)和LUX(荧光素酶)标记辅助菌株,共接种后检测根瘤菌定殖量(图5)。
- 生物膜形成:辅助菌株分泌的酰基高丝氨酸内酯(AHL, Acyl Homoserine Lactone)促进BXYD3生物膜形成(图6)。
4. 简化Syncom构建与验证
- SFSyncom组成:BXYD3(核心)+ NXR320 + SDR495(辅助)。
- 田间对比:SFSyncom效果与复杂Syncom(SC1-B)相当,根瘤数提高40%,产量增加25%(图7)。
创新方法:
- AHL检测:利用报告菌株Agrobacterium tumefaciens KYC55验证Pantoea产AHL的能力(图6a)。
- 基因组分析:对NXR320全基因组测序,鉴定AHL合成相关基因(如nxr320002405),并构建突变体(nxr320ahl-del)验证功能(图S13–S14)。
科学意义:
1. 揭示了Pantoea通过AHL信号分子调控根瘤菌-宿主互作的新机制。
2. 提出“核心-辅助菌株”策略简化Syncom构建,为微生物群落设计提供新范式。
应用价值:
- 农业实践:SFSyncom可减少化肥依赖,提升大豆产量(种子重量增加25%)。
- 技术推广:简化Syncom更易标准化生产,适于大规模田间应用。
(报告完)