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石墨烯增强的生物标本近原子分辨率三维化学成像

期刊:Advanced Functional MaterialsDOI:10.1002/adfm.201801439

这篇文档属于类型a,即报告了一项原创性研究。以下是针对该研究的学术报告:


一、研究作者、机构及发表信息

本研究由Vahid R. AdinehChangxi Zheng(共同一作)等团队完成,主要作者来自澳大利亚莫纳什大学(Monash University)机械与航空航天工程系、土木工程系、材料科学系等多个院系,以及迪肯大学(Deakin University)前沿材料研究所和墨尔本大学(University of Melbourne)药理与治疗学系。研究发表于《Advanced Functional Materials》期刊,发表日期为2018年6月20日,文章编号1801439


二、学术背景

研究领域与背景

本研究属于生物纳米表征技术材料科学的交叉领域,聚焦于原子探针断层扫描技术(Atom Probe Tomography, APT)在生物样本高分辨率三维化学成像中的应用。APT是目前唯一能实现近原子级分辨率三维化学成分分析的技术,但传统APT要求样品具有高导电性,而生物样本(如细胞)多为绝缘体,导致其应用受限。

研究动机与目标

此前,研究者尝试通过金属涂层(如银溅射)改善生物样本导电性,但涂层厚度和均匀性不足,且可能破坏样品结构。本研究提出利用石墨烯(graphene)的超薄、高导电性和机械强度,开发一种新型封装技术,以解决绝缘生物样本的APT成像难题。核心目标包括:
1. 开发石墨烯封装生物样本的标准化流程;
2. 验证石墨烯涂层对APT成像质量(如质量分辨率、数据准确性)的提升;
3. 实现细菌细胞等生物样本的近原子级三维化学图谱重建。


三、研究流程与方法

1. 石墨烯封装技术开发

  • 样本制备
    • 金纳米颗粒(Au NPs):通过种子生长法合成,嵌入环氧树脂(epon resin)中,并聚焦离子束(FIB)加工成针尖状(半径<75 nm)。
    • 细菌细胞:选用耐药性鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii),经固定、脱水后,通过FIB原位切割并制备为APT针尖样品。
  • 石墨烯转移
    • 采用水膜辅助法:将化学气相沉积(CVD)生长的单层石墨烯从铜箔转移至样品表面。具体步骤包括:氨水过硫酸盐(APS)蚀刻铜箔、去离子水清洗、镍铬合金环捞取石墨烯并覆盖样品。
    • 创新点:该方法避免了高温或化学处理,适合脆弱生物样本,成功率>60%。

2. 导电性验证实验

  • 纳米颗粒膜器件测试:构建金纳米颗粒-聚苯乙烯绝缘复合膜,对比石墨烯涂层前后的电流-电压曲线。结果显示,石墨烯使电流从纳安级提升至微安级,证实其显著增强电荷传输能力。

3. APT成像与数据分析

  • 仪器参数:使用LEAP 4000 HR原子探针,电压脉冲模式(4 kV,200 kHz),低温(60 K)环境。
  • 数据重建:通过IVAS 3.6.12软件处理飞行时间质谱数据,结合Avizo 9.1和Blender进行三维可视化。

四、主要结果

1. 石墨烯涂层的有效性

  • 电子显微镜表征:SEM和HAADF-STEM显示石墨烯均匀包裹样品针尖,无几何形变(图2)。褶皱区域证实石墨烯完整覆盖,厚度为单原子层。
  • 质量分辨率提升:石墨烯涂层的Au NPs样品,其APT质谱中Au²⁺峰的质量分辨率(MRP)达955,显著高于银溅射涂层的492(图4e)。

2. 生物样本成像成功

  • 细菌细胞膜三维图谱:首次实现细菌细胞膜近原子级成像(图5a),检测到C、N、O等元素及其分子碎片(如CO、CO₂)。
  • 低电压优势:石墨烯涂层使操作电压降低,减少场致机械应力,数据采集成功率从5%(银涂层)提升至15%。

五、结论与价值

科学意义

  1. 技术突破:石墨烯封装解决了绝缘生物样本APT成像的导电性瓶颈,为细胞内化学组分的原位分析提供了新工具。
  2. 方法普适性:该技术可扩展至其他纳米膜或生物结构(如水纳米膜,图S14),推动纳米生物界面研究。

应用前景

  • 抗生素耐药性研究:通过耐药菌细胞膜成分分析,揭示其物理化学屏障机制。
  • 材料科学:为柔性电子器件或生物传感器中纳米材料的界面表征提供新方法。

六、研究亮点

  1. 创新方法:水膜辅助石墨烯转移技术兼具温和性与高成功率,避免了传统PVD涂层的局限性。
  2. 性能提升:石墨烯的超薄特性显著提高APT质量分辨率(MRP翻倍),数据准确性达近原子级。
  3. 跨学科应用:首次将二维材料封装与生物APT结合,开辟了生物纳米表征的新方向。

七、其他价值

  • 专利与竞争性:团队已申请澳大利亚临时专利(No. 2017902581),凸显技术独特性。
  • 计算模拟支持:通过电场分布模拟(支持信息S6),进一步验证石墨烯涂层改善蒸发场均匀性的机制。

(全文约2000字)

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