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通过ZmXYXT2调控细胞壁结构和组分增强玉米对轮枝镰刀菌的抗性

期刊:journal of advanced researchDOI:10.1016/j.jare.2025.02.023

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作者及研究机构
本研究由Yufang Xu、Yudong Fan、Lujie Liu、Jiansheng Cao、Junzhe Zhou、Enpeng Liu、Ruiqi Li、Peipei Ma、Wen Yao、Jianyu Wu、Tao Li和Huiyong Zhang等作者共同完成。研究主要来自河南农业大学生命科学学院和农学院,以及河南粮食作物协同创新中心和国家小麦玉米作物科学重点实验室。该研究于2025年发表在期刊《Journal of Advanced Research》上。

学术背景
玉米(Zea mays L.)是全球重要的粮食作物、饲料来源、生物能源作物和工业原材料。然而,玉米在其生长过程中常受到多种病原真菌的侵害,其中由尖孢镰刀菌(Fusarium verticillioides)引起的病害尤为严重,包括苗枯病、茎腐病、穗腐病和种子腐烂病等。这些病害不仅导致玉米减产,还产生真菌毒素,如伏马菌素B1(fumonisin B1),对人类和动物健康构成威胁。尽管已有研究通过数量性状位点(QTL)和全基因组关联分析(GWAS)等方法鉴定了部分抗病基因,但关于玉米抗尖孢镰刀菌的分子机制仍不清楚。因此,本研究旨在通过调控细胞壁结构和组分来增强玉米对尖孢镰刀菌的抗性。

研究流程
本研究主要包括以下几个步骤:
1. 基因功能鉴定:首先,研究者通过实时定量PCR(qPCR)和瞬时转化玉米原生质体分析了ZmXYXT2基因的表达模式和亚细胞定位。ZmXYXT2编码一种推测的木聚糖木糖基转移酶(xylan xylosyltransferase),位于内质网和高尔基体中。
2. 突变体与过表达植株的构建:研究者从乙基甲烷磺酸盐(EMS)诱变库中筛选出ZmXYXT2突变体,并通过农杆菌介导的转化技术构建了ZmXYXT2过表达植株。这些植株用于人工接种尖孢镰刀菌并进行病害严重度评估。
3. 病害抗性评估:研究者对ZmXYXT2突变体和过表达植株进行了尖孢镰刀菌的苗枯病、茎腐病、穗腐病和种子腐烂病的抗性评估。通过组织学染色、细胞壁成分分析等方法,阐明了ZmXYXT2调控抗病性的机制。
4. 细胞壁结构与成分分析:研究者利用透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)观察了细胞壁结构的变化,并通过高效液相色谱(HPLC)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析了细胞壁成分的变化。
5. 数据分析:所有实验均进行了至少三次独立生物学重复,数据以均值±标准差(SD)表示,统计显著性通过学生t检验进行评估。

主要结果
1. ZmXYXT2的功能鉴定:研究发现,ZmXYXT2在玉米的多种组织中广泛表达,且在尖孢镰刀菌感染后显著上调。ZmXYXT2突变体对尖孢镰刀菌引起的多种病害表现出高度易感性,而ZmXYXT2过表达植株则表现出显著增强的抗病性。
2. 细胞壁结构与组分的变化:ZmXYXT2突变体的细胞壁厚度显著降低,导致茎秆机械强度下降。细胞壁成分分析显示,突变体中木聚糖和阿拉伯糖的含量显著减少,而ZmXYXT2过表达植株中这些成分的含量显著增加。此外,ZmXYXT2突变体中的阿魏酸(ferulic acid)、纤维素和木质素含量也显著降低。
3. 病害抗性机制:ZmXYXT2通过调控细胞壁成分,增强了细胞壁的厚度和机械强度,从而阻碍了尖孢镰刀菌的侵入和定殖。过表达ZmXYXT2的玉米植株在保持产量的同时,显著提高了对尖孢镰刀菌的抗性。

结论
本研究表明,ZmXYXT2通过调控细胞壁结构和组分,增强了玉米对尖孢镰刀菌引起的多种病害的抗性。ZmXYXT2过表达植株在保持产量的同时,显著提高了对尖孢镰刀菌的抗性,为培育抗病玉米品种提供了新的策略。此外,研究还揭示了细胞壁成分在植物抗病性中的重要作用,为未来研究植物与病原菌相互作用提供了新的视角。

研究亮点
1. 重要发现:ZmXYXT2通过调控细胞壁成分,显著增强了玉米对尖孢镰刀菌的抗性,且不影响产量。
2. 方法创新:本研究首次利用MALDI-TOF-MS分析了玉米细胞壁中木聚糖的侧链修饰,揭示了ZmXYXT2在木聚糖合成中的关键作用。
3. 研究对象的特殊性:本研究不仅关注单一病害的抗性,还全面评估了ZmXYXT2对多种尖孢镰刀菌引起的病害的抗性,为培育综合抗病玉米品种提供了重要依据。

其他有价值的内容
本研究还通过组织学染色和真菌定量分析,详细描述了尖孢镰刀菌在ZmXYXT2突变体和过表达植株中的侵入和定殖过程,进一步验证了ZmXYXT2在抗病性中的关键作用。此外,研究还提供了详细的细胞壁成分分析方法,为未来研究植物细胞壁与病原菌相互作用提供了重要参考。

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