本文的主要作者包括 Kristin Saltonstall、Kelsey Glennon、Alison Burnett、Richard B. Hunter 和 Kimberly L. Hunter。Kristin Saltonstall 主要隶属于 Horn Point Laboratory,Maryland Environmental Science Center,现供职于 Smithsonian Tropical Research Institute;Kelsey Glennon 等其他作者则隶属于 Salisbury University 的 Department of Biological Sciences。该研究发表于 2007 年的《Rhodora》期刊,文章题目为“Comparison of Morphological Variation Indicative of Ploidy Level in Phragmites australis (Poaceae) from Eastern North America”。
研究领域聚焦于植物学和生态学,尤其是涉及多倍体性(polyploidy)在植物表现型、生态适应性方面的功能和影响。主要研究对象是芦苇(Phragmites australis),一种分布广泛的多年生禾本科草本植物。已有研究指出,芦苇在北美洲的本地和外来亚种间存在显著的形态差异,这种差异可能与倍体水平(ploidy level)相关。这些形态特征包括保卫细胞(guard cell)大小和气孔密度(stomatal density)。以往的研究还表明,外来亚种具有很强的入侵性,会迅速形成单一优势种群,对本地生态系统造成显著影响。
研究的核心目标是探讨北美洲本地和外来亚种的 Phragmites australis 是否在倍体水平上存在差异,是否可以通过保卫细胞大小和气孔密度等形态特征准确指示倍体水平。此外,研究还讨论了这些形态差异在外来种入侵生物学上的潜在生态意义。
本研究通过以下几个主要流程展开:
研究小组在北美洲东部地区采集了芦苇样本,重点覆盖了切萨皮克湾区域,包括 Maryland、Delaware 和 Virginia 等地。共采集了 69 个种群的样本,其中包括 36 个外来种群和 33 个本地种群。这些样本的种群归属通过限制性片段长度多态性(RFLP)分析确认,并利用叶绿体 DNA(cpDNA)的非编码区序列区分本地和外来芦苇种群。
此外,样本还分为不同地域和 cpDNA 单倍型类型进行分类分析,本地种群涉及 7 种单倍型(E、F、G、S、Z、AB 和 AC)。
研究通过获取叶片表皮剥离样本测量保卫细胞的长、宽及其计算的矩形面积。气孔密度则以单位叶片表面积内气孔的数量统计得出。具体方法包括: - 保卫细胞测量:用透明指甲油涂覆叶片表面,从中剥离表皮,借助显微镜(400 倍放大倍数)获取保卫细胞的长度和宽度测量值。 - 气孔密度测量:在叶片腹面和背面各三处取样拍摄显微图像,在约 3500 倍放大倍数下计算每平方毫米的气孔数量。
确保样本保存方式对测量结果无影响,同时对同一种群多个样本进行重复性验证分析。
为直接检测倍体水平,研究使用流式细胞术测定 2C DNA 含量(表征基因组大小)。研究对象包括 6 个外来种群(单倍型 M)和 7 个本地种群(涵盖单倍型 E、F、Z 和 AB)。以大麦(Hordeum vulgare)为内参核酸标准,分析叶片组织 DNA 含量,得出两个亚种的倍体水平数据。
通过统计学分析(如 t 检验和方差分析 ANOVA)对保卫细胞大小、气孔密度及 DNA 含量数据进行比较。此外,利用主成分分析(PCA)提取主要变量,探讨不同种群之间形态学特征的分布模式。
主成分分析表明,本地种和外来种的形态学特征在第一主成分(PC1)上的分布极为分明,进一步验证两亚种之间在保卫细胞大小与气孔密度上的区别。
本研究指出,尽管外来种 Phragmites australis 在保卫细胞大小和气孔密度上与本地种显著不同,这些差异未能和倍体水平直接相关。外来种和本地种的倍体水平可能一致,均为四倍体。
这些形态特征(保卫细胞面积与气孔密度)被证实为区分本地和外来种的有效标志,但并非倍体水平的准确指示器。研究还发现,外来种较高的气孔密度可能在部分环境条件下具备优势潜力,例如在光照与 CO2 竞争强烈的高密度群落中,更高的气孔密度可能增强光合作用效率,从而部分解释外来种的生态入侵能力。
通过本研究,本地与外来种 Phragmites australis 的形态差异与生态适应性差异得到了新的认识,特别是在未来湿地生境管理、保护和治理中具有重要参考价值。