朱斌、王得春、段安帅、张文皓、刘权等来自中国人民解放军西藏军区总医院的研究团队在2025年发表于《基础医学理论研究》第7卷第1期的论文中，探讨了脂肪间充质干细胞（Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells, ADSCs）来源的外泌体在低氧条件下促进血管生成的机制。该研究为临床治疗血管生成相关疾病提供了新的思路。

学术背景

血管生成在许多生理和病理过程中起着关键作用，如组织发育、缺血修复和炎症反应。低氧环境是许多疾病（如缺血性疾病）的共同特征，而间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells, MSCs）在低氧条件下表现出显著的血管生成促进作用。研究表明，MSCs通过分泌外泌体（Exosomes）向受体细胞传递信号分子，影响其增殖、迁移和血管生成能力。然而，低氧环境下MSCs外泌体促进血管生成的具体机制尚未完全阐明。因此，本研究旨在探究低氧条件下ADSCs外泌体对人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cells, HUVECs）增殖、迁移和血管生成的影响，并揭示其分子机制。

研究流程

1. 细胞培养与低氧处理
   研究首先将骨髓间充质干细胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells, BMSCs）接种于T25培养皿中，待细胞贴壁后更换为不含外泌体的培养基，并将其置于低氧培养箱（1% O2、5% CO2、94% N2）中培养24小时，收集培养上清液。同时，将HUVECs接种于6孔板中，加入ECM基质，置于二氧化碳培养箱中培养，每3天更换一次培养基。

2. 外泌体的提取与鉴定
   通过超速离心法从低氧和常态氧条件下的BMSCs培养上清液中提取外泌体，并使用透射电镜观察其形态学特征。此外，采用Western blot技术检测外泌体标志性蛋白CD9和CD63的表达，以确认外泌体的成功提取。

3. 细胞活性检测（CCK-8实验）
   将HUVECs接种于96孔板中，分别用低氧和常态氧条件下的BMSCs外泌体处理48小时，随后加入CCK-8试剂，室温孵育4小时后，在450 nm波长下检测光密度（OD）值，评估细胞活性。

4. 细胞迁移检测（Transwell实验）
   将HUVECs接种于Transwell小室中，分别用低氧和常态氧条件下的BMSCs外泌体处理，观察细胞迁移数量，评估外泌体对细胞迁移能力的影响。

5. 血管生成功能检测（成管实验）
   在96孔板中加入基质凝胶，将HUVECs接种于凝胶表面，分别用低氧和常态氧条件下的BMSCs外泌体处理，观察血管生成情况，并使用ImageJ软件计算血管长度。

6. 蛋白表达检测（Western blot实验）
   采用Western blot技术检测低氧和常态氧条件下BMSCs外泌体处理的HUVECs中血管新生相关蛋白（HIF-1α、VEGF）及磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）的表达水平。

主要结果

1. 外泌体的成功提取与鉴定
   透射电镜观察显示，低氧和常态氧条件下的BMSCs外泌体均呈现典型的杯状形态。Western blot检测证实外泌体中CD9和CD63蛋白的表达，表明外泌体提取成功。

2. 低氧外泌体显著促进HUVECs活性
   CCK-8实验结果显示，低氧外泌体处理的HUVECs活性显著高于常态氧外泌体组（p < 0.05），表明低氧外泌体能够有效促进细胞增殖。

3. 低氧外泌体增强HUVECs迁移能力
   Transwell实验结果显示，低氧外泌体处理的HUVECs迁移数量显著多于常态氧外泌体组（p < 0.05），表明低氧外泌体能够促进细胞迁移。

4. 低氧外泌体促进血管生成
   成管实验结果显示，低氧外泌体处理的HUVECs血管生成长度显著长于常态氧外泌体组（p < 0.05），表明低氧外泌体能够促进血管生成。

5. 低氧外泌体上调血管新生相关蛋白表达
   Western blot实验结果显示，低氧外泌体处理的HUVECs中HIF-1α、VEGF及p-JNK的表达水平显著高于常态氧外泌体组（p < 0.05），表明低氧外泌体通过激活HIF-1α/VEGF/JNK信号通路促进血管生成。

结论与意义

本研究证实，低氧条件下ADSCs外泌体通过上调HIF-1α/VEGF/JNK信号通路，显著促进HUVECs的增殖、迁移和血管生成。这一发现为临床治疗血管生成相关疾病（如缺血性疾病）提供了新的治疗方向。此外，研究揭示了低氧环境下MSCs外泌体促进血管生成的分子机制，为后续研究奠定了理论基础。

研究亮点

1. 重要发现
   首次揭示了低氧条件下ADSCs外泌体通过HIF-1α/VEGF/JNK信号通路促进血管生成的机制。

2. 方法创新
   采用超速离心法提取外泌体，并结合透射电镜和Western blot技术进行鉴定，确保了实验结果的可靠性。

3. 应用价值
   研究结果为低氧相关血管生成疾病的治疗提供了新的思路，具有重要的临床应用潜力。

其他有价值的内容

本研究得到了西藏自治区重点研发计划项目（XZ202001ZY0059G）和中央引导地方基地创新建设项目（ZYYD202201YD004C）的支持，体现了研究的区域特色和政策导向。