黄芪多糖对小鼠血清细胞因子水平及精子发生的影响研究
作者及发表信息
本研究由江苏海洋大学江苏省海洋生物资源与环境重点实验室的Chunjiang Qiu和Yuanxia Cheng(通讯作者)团队完成,发表于2019年的*International Journal of Biological Macromolecules*(卷140,页码xxx,DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2019.08.191)。
学术背景
黄芪(*Astragalus membranaceus*)是一种传统中药,富含多糖、黄酮类等活性成分,具有抗菌、抗肿瘤、免疫调节等多种生物活性。其中,黄芪多糖(AMP)是其主要活性成分之一,但其对生殖系统损伤的修复作用及免疫调节机制尚未充分研究。本研究旨在探讨AMP对环磷酰胺(cyclophosphamide)诱导的生殖系统损伤小鼠的血清细胞因子水平及精子发生的影响,为AMP的临床应用提供实验依据。
研究流程与方法
1. AMP的提取与表征
- 提取方法:采用热水浸提法从黄芪根中提取粗多糖,经Sevag法去蛋白、透析(截留分子量1000 Da)、乙醇沉淀及DEAE-纤维素柱纯化,最终获得水溶性AMP。
- 表征分析:通过高效液相色谱(HPLC)测定AMP分子量为10.40 kDa,糖含量91.26%,蛋白质含量3.41%,单糖组成主要为葡萄糖。
2. 动物实验设计
- 实验对象:60只昆明小鼠随机分为5组:
- 正常对照组(NCG):生理盐水灌胃;
- 模型对照组(MCG):环磷酰胺(28 mg/kg)腹腔注射;
- 治疗组:环磷酰胺+不同剂量AMP灌胃(25、50、75 mg/kg)。
- 处理周期:连续5天干预后,采集血清和睾丸组织。
3. 检测指标
- 血清细胞因子:ELISA法检测IL-11、TNF-α和IFN-γ水平。
- 睾丸参数:测定蛋白质含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及一氧化氮(NO)水平。
- 精子质量:分析精子密度、运动力及正常形态率。
主要结果
AMP提升血清细胞因子水平
- 模型组(MCG)的IL-11、TNF-α和IFN-γ水平显著低于正常组(*p < 0.05*),而AMP治疗组(尤其是50和75 mg/kg)显著回升(表1)。例如,IL-11在75 mg/kg组达75.46 pg/ml,接近正常组水平(107.18 pg/ml)。
- 意义:表明AMP通过调节IL-11等免疫相关因子,改善环磷酰胺导致的免疫抑制。
AMP改善睾丸抗氧化能力
- 模型组睾丸SOD活性(32.71 U/mg蛋白)显著低于正常组(46.52 U/mg),AMP治疗组恢复至42.52 U/mg(75 mg/kg);同时,NO水平(氧化应激标志物)从234.13 μmol/g(MCG)降至159.81 μmol/g(表2)。
- 意义:AMP通过增强SOD活性和降低氧化损伤,保护睾丸功能。
AMP促进精子发生
- 模型组精子密度(1.97×10⁷/ml)、运动力(33.41%)及正常形态率(51.29%)均显著低于正常组,而50 mg/kg AMP治疗组分别提升至3.61×10⁷/ml、51.67%和64.62%(表3)。
- 机制:AMP可能通过降低睾丸NO水平和提高蛋白质合成,改善精子发生微环境。
结论与价值
- 科学价值:首次系统证明AMP通过调节IL-11/TNF-α/IFN-γ轴和抗氧化途径,缓解环磷酰胺对小鼠生殖系统的损伤,为AMP作为免疫调节剂和生殖保护剂提供理论支持。
- 应用前景:AMP或可辅助治疗化疗导致的男性不育及免疫功能低下。
研究亮点
- 方法创新:结合多糖纯化技术与生殖-免疫双维度评价体系。
- 发现新颖性:揭示AMP通过IL-11途径改善精子发生的机制,填补了该领域空白。
- 数据严谨性:所有实验均设三重重复,统计分析采用SPSS 17.0,结果具可重复性。
局限性:未探讨AMP的长期毒性及分子机制(如信号通路),需后续研究完善。