该研究由Zhi-Chun Zhang、Yan Liu、Liu-Ling Xiao、Shu-Fen Li、Jing-Hui Jiang、Yue Zhao、Shu-Wen Qian、Qi-Qun Tang和Xi Li共同完成，主要研究机构为复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系及教育部代谢与分子医学重点实验室。该研究于2015年8月10日发表在《Journal of Hepatology》上。

学术背景
非酒精性脂肪肝病（NAFLD）是一种常见的慢性肝病，其发病机制复杂，涉及胰岛素抵抗、脂质代谢紊乱等多种因素。研究表明，雌激素在女性中对脂肪肝具有保护作用，绝经前女性的NAFLD发病率显著低于同龄男性及绝经后女性。然而，雌激素如何通过分子机制抑制脂肪肝的具体机制尚不明确。近年来，微小RNA（miRNA）在调控糖脂代谢中的作用逐渐被揭示，但miR-125b在肝脏糖脂代谢中的功能尚未被深入研究。本研究旨在从miRNA的角度，探讨雌激素通过miR-125b抑制脂肪肝的分子机制。

研究流程
研究分为多个步骤，首先通过TaqMan miRNA检测法评估miR-125b的表达水平，并通过荧光素酶报告基因实验和染色质免疫沉淀（ChIP）实验验证雌激素通过雌激素受体α（ERα）调控miR-125b的机制。接着，使用Nile Red和Oil Red O染色检测肝细胞中的脂质含量，并通过腺病毒注射在体内过表达或抑制miR-125b，以研究其在脂肪肝中的作用。此外，研究还通过RNA干扰技术敲低ERα，进一步验证ERα在miR-125b表达中的调控作用。

研究使用的实验对象包括C57BL/6J雌性小鼠、HepG2细胞和小鼠原代肝细胞。小鼠被分为假手术组、卵巢切除组（OVX）以及卵巢切除后注射miR-125b过表达腺病毒的组别，所有小鼠均接受高脂饮食（HFD）喂养。实验过程中，研究人员通过Western blotting检测ERα和脂肪酸合成酶（FAS）的蛋白表达水平，并通过实时定量PCR（RT-qPCR）分析脂质合成相关基因的表达变化。

主要结果
研究发现，雌激素通过ERα直接调控miR-125b的表达，且在体外和体内实验中均观察到miR-125b抑制脂质积累的作用。在HepG2细胞和小鼠原代肝细胞中，miR-125b过表达显著降低了细胞内脂质含量，而miR-125b抑制剂则略微促进了脂质积累。在体内实验中，卵巢切除小鼠注射miR-125b过表达腺病毒后，肝脏脂肪变性显著减轻，表现为肝脏甘油三酯（TG）和胆固醇含量降低，同时血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平也显著下降。此外，miR-125b过表达还抑制了脂肪酸合成和TG合成相关基因的表达，并降低了炎症因子的水平。

研究进一步发现，FAS是miR-125b的直接靶基因。通过荧光素酶报告基因实验，研究人员证实miR-125b能够与FAS的编码区结合，从而抑制其表达。这一发现为miR-125b抑制脂肪肝的分子机制提供了重要证据。

结论
该研究揭示了一种新的机制，即雌激素通过ERα上调miR-125b的表达，进而抑制肝脏脂肪积累和炎症反应，从而保护女性免受NAFLD的侵害。这一发现不仅深化了我们对雌激素保护作用的理解，还为NAFLD的治疗提供了新的潜在靶点。

研究亮点
1. 首次揭示了雌激素通过miR-125b抑制脂肪肝的分子机制。
2. 证实FAS是miR-125b的直接靶基因，为miR-125b的脂质代谢调控功能提供了分子基础。
3. 通过体内外实验全面验证了miR-125b在脂肪肝中的保护作用，研究结果具有较高的可靠性和科学性。

其他有价值的内容
研究还发现，miR-125b不仅能够抑制脂质合成，还能够减轻肝脏炎症反应，这为进一步探索miR-125b在代谢性疾病中的多功能性提供了线索。此外，研究中使用的高脂饮食诱导的脂肪肝模型为未来研究NAFLD的发病机制和治疗方法提供了重要的实验工具。

该研究通过系统的实验设计和严谨的数据分析，揭示了雌激素-miR-125b轴在脂肪肝中的保护作用，为NAFLD的防治提供了新的思路和靶点。