本文系一项原创研究，由来自北京大学药学院天然及仿生药物国家重点实验室团队完成，主要作者包括Peng Gao和Shuo Yuan等。文章发表在《Journal of Ethnopharmacology》期刊，正式接受日期为2025年1月9日，并于同年1月11日上线。研究以中药植物延胡索（Corydalis decumbens）为研究基础，探讨其抗类风湿性关节炎（RA，rheumatoid arthritis）和抗炎相关的分子靶点及药效成分。
类风湿性关节炎是一种全身性、持续性的自身免疫疾病，其病理特点包括滑膜增生、软骨及骨破坏等。主要致病因子为巨噬细胞等免疫细胞释放的炎症因子（如IL-6、TNF-α、IL-1β），通过TLR4（toll-like receptor 4，模式识别受体）和NF-κB相关信号通路触发炎症级联反应。然而，在RA的治疗领域，现有药物如NSAIDs（非甾体抗炎药）和生物制剂虽有一定效果，但仍存在显著的不良反应和高成本问题。
中药延胡索作为传统治疗RA的药物，已有一定的应用历史，但其抗炎分子靶点、高效成分及药理机制尚不明确。本研究的目的即是通过多层次的现代分子生物学及化学手段，明确延胡索在抗RA与抗炎中的作用靶点及相关机制。
为实现研究目标，作者们设计并执行了一套复杂的实验流程，主要包括以下步骤：
研究团队自延胡索的根茎部分提取活性物质，制备了高纯度乙醇提取物，并通过胶原诱导型关节炎（CIA，collagen II-induced arthritis）模型大鼠（SD大鼠）验证其治疗效应。在CIA大鼠中，以RA症状评分、后足肿胀体积、MRI及微CT等影像分析评价其药效，并测定血浆中关键炎症因子（如IL-6、TNF-α等）的变化情况。此外，通过组织病理学（H&E染色）观察关节滑膜病理特性。
通过热蛋白质组学（TPP，Thermal Proteome Profiling）技术，在RAW264.7小鼠巨噬细胞中筛选与延胡索提取物直接作用的关键细胞靶点。随后，使用生物层干涉技术（BLI，Bio-layer Interferometry）分析提取物各主要成分和特定靶点的结合情况，并结合面向Fosl2蛋白的点突变实验以及分子对接实验确定结合位点。
研究重点分析了延胡索中的多种主要生物碱（如protoberberine类和phthalideisoquinoline类），重点关注四氢巴马汀鹧（Tetrahydropalmatrubin，THP）的促抗炎效应。通过Western blot、荧光偏振实验及转录组学分析，明确其对炎症相关信号通路（如NF-κB、AP-1等的抑制机制）的影响。此外，分子探针及活性位点拉取实验证实了THP与AP-1核心调控因子Fosl2之间的直接结合。
采用RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）、ELISA（酶联免疫吸附实验）和免疫共沉淀（Co-IP，Co-immunoprecipitation）技术，分析THP在分子水平对巨噬细胞炎症水平及相关信号路径的调节作用。
实验数据表明，延胡索提取物能显著缓解CIA大鼠的关节肿胀，降低RA评分；MRI与CT影像显示，药物可修复关节损伤、减轻骨破坏。此外，ELISA数据显示，血浆中的IL-6、TNF-α、IL-1β等炎症因子水平明显下降。
研究发现，延胡索提取物可显著降低LPS（脂多糖）诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症水平，包括NO、TNF-α和IL-6的分泌，且具有显著的剂量依赖关系。进一步实验表明，这种抗炎效应通过对NF-κB转录活性及NLRP3炎症小体路径的抑制实现。
通过TPP技术筛查，研究明确Fosl2为延胡索关键成分的直接靶点。实验发现，延胡索提取物显著抑制由Fosl2主导的AP-1活性（Activator Protein-1，活化蛋白1）。BLI实验进一步证实了生物碱类物质对Fosl2的靶向结合，其中四氢巴马汀鹧（THP）的亲和值最强。
THP通过与Fosl2第Asp4位氨基酸形成氢键，增强了Fosl2与c-Jun的核内结合，从而阻断AP-1活化并抑制下游炎症基因的表达。这一作用在IL-6、MCP-1等关键因子水平得到了验证。
转录组学分析表明，THP可广泛下调炎症相关的基因（IL-6、CCL7等）及代谢调控基因（FABP4等）。分析同时表明，THP可抑制氧化磷酸化、辅助FOXO信号通路的调控，从而潜在修复RA中免疫及代谢紊乱。
本文首次明确了延胡索治疗类风湿性关节炎的分子靶点及高效成分，阐释了其抗炎机制，提出Fosl2这一“难以成药的靶点”（undruggable target）的可药用性，具有重要的学术价值。同时，THP作为潜在抗RA药物或候选化合物的开发潜力巨大，对新药研发和商业化具有积极意义。
总而言之，该研究为RA治疗领域提供了重要的新见解，不仅深化了对延胡索的药理认知，还推动了其在现代医学领域的应用潜力。