B族链球菌（Group B Streptococcus, GBS）对妊娠晚期阴道微生物群及炎症的影响：一项基于16S rRNA测序的研究报告

作者与发表信息
本研究由Wenkai Yu、Mengyi Sun（共同第一作者）及Kang Zheng（通讯作者）团队完成，作者单位为中国山东省济宁市第一人民医院检验科。研究发表于BMC Microbiology期刊（2025年），文章标题为《Unveiling the microbial shift: the impact of group B streptococcus on vaginal microbiota and inflammation in late pregnancy》，开放获取许可为CC BY-NC-ND 4.0。

学术背景
GBS是一种常见的女性生殖道和直肠定植菌，全球约1970万孕妇携带GBS，平均定植率为17.1%。妊娠晚期GBS感染可导致不良妊娠结局（如早产、新生儿败血症等），且母婴垂直传播风险高达50%。尽管既往研究多关注GBS定植率，但其对阴道微生物群组成及系统性炎症的影响尚不明确。本研究旨在通过16S rRNA基因测序技术，分析GBS定植孕妇的阴道微生物群变化，并探讨微生物群与系统性炎症标志物的相关性，为临床干预提供理论依据。

研究流程与方法
1. 研究对象与分组
- 纳入39名妊娠晚期孕妇（孕周≥35周），根据GBS感染状态分为：
- GBS阴性组（n=19）：阴道分泌物PCR检测阴性。
- GBS阳性组（n=20）：PCR检测阳性。
- 排除标准：近两周使用抗生素、妊娠期高血压、糖尿病等合并症。

1. 样本采集与检测

   • 阴道分泌物：无菌棉签采集阴道中段分泌物，置于无营养转运培养基，24小时内处理。
     
   • 血液样本：空腹静脉血检测炎症标志物，包括中性粒细胞计数（NEU）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）、白细胞介素-6（IL-6）、降钙素原（PCT）和红细胞沉降率（ESR）。
     

2. 微生物DNA提取与测序

   • 使用Liferiver核酸提取试剂盒提取DNA，通过Illumina NextSeq 2000平台对16S rRNA基因V3-V4区进行测序。
     
   • 数据分析流程：
     
     • 质量控制：Fastp软件过滤低质量序列。
       
     • OTU聚类：UPARSE算法（97%相似度阈值）。
       
     • 物种注释：RDP分类器比对SILVA v138数据库。
       
     • 多样性分析：计算Chao1、Shannon指数，基于UniFrac距离进行PCoA/NMDS分析。
       

3. 炎症标志物检测

   • 全血细胞计数（Sysmex XN-2000分析仪）、hs-CRP（比浊法）、IL-6/PCT（化学发光法）、ESR（动态光度法）。
     

4. 统计学分析

   • 使用SPSS 26.0和R软件进行差异分析（t检验/Mann-Whitney U检验）。
     
   • LEfSe分析（LDA>3）鉴定组间差异菌群。
     
   • Spearman相关性分析评估微生物群与炎症标志物的关联。
     

主要结果
1. 微生物群多样性变化
- β多样性：GBS阳性组阴道微生物群结构显著改变（PCoA/NMDS，p<0.05），但α多样性（Shannon/Chao1指数）无统计学差异。
- 菌群组成：
- GBS阴性组：厚壁菌门（Firmicutes）占主导（71.2%），乳酸杆菌属（Lactobacillus）丰度较高（68.5%），尤其是Lactobacillus jensenii（1.99%）。
- GBS阳性组：放线菌门（Actinobacteriota）和拟杆菌门（Bacteroidota）比例升高，乳酸杆菌丰度降低（52.1%），Gardnerella vaginalis（p<0.05）和Streptococcus agalactiae（GBS，p<0.001）显著富集。

1. LEfSe分析

   • GBS阳性组：Gardnerella（LDA=3.79）为标志性菌属。
     
   • GBS阴性组：Gemella（LDA=3.35）和Gemellaceae科富集。
     

2. 炎症标志物差异

   • GBS阳性组NEU、hs-CRP、IL-6、PCT、ESR均显著升高（p<0.01），提示系统性炎症状态。
     

3. 微生物-炎症相关性

   • 乳酸杆菌与hs-CRP、IL-6、ESR呈负相关（p<0.05）。
     
   • 双歧杆菌（Bifidobacterium）与hs-CRP/IL-6正相关，Prevotella和Dialister与ESR正相关（p<0.05）。
     

结论与意义
1. 科学价值
- 首次揭示GBS定植导致阴道微生物群失衡（乳酸杆菌减少、致病菌增加）与系统性炎症的关联，为GBS相关妊娠并发症的机制研究提供新视角。
- 提出Lactobacillus jensenii和L. reuteri的减少可能是GBS定植的生物标志物。

1. 应用价值
   
   • 临床可通过监测hs-CRP、IL-6等炎症标志物评估GBS感染风险。
     
   • 未来可开发乳酸杆菌靶向疗法（如益生菌干预）以恢复微生态平衡。
     

研究亮点
1. 方法创新：结合16S rRNA测序与多炎症标志物分析，全面解析GBS的微生态影响。
2. 发现新颖：明确Gardnerella vaginalis与GBS的协同致病作用，以及Gemella在健康阴道微环境中的潜在保护角色。
3. 临床转化潜力：为GBS筛查和个性化治疗提供微生物群靶点。

局限性
样本量较小（n=39），未来需扩大队列并开展纵向研究验证因果关联。