这篇文档属于类型a，即报告了一项单一原创研究的科学论文。以下是对该研究的详细介绍：
该研究由Carla Bianca Luena Victorio、Yishi Xu、Qimei Ng、Beng Hooi Chua、Sylvie Alonso、Vincent T. K. Chow和Kaw Bing Chua共同完成。研究机构包括新加坡国立大学、Curtin University等。研究发表于Scientific Reports期刊，时间为2016年6月30日。
该研究的主要科学领域是病毒学，特别是肠道病毒71型（EV-A71）的神经病理学研究。EV-A71是一种嗜神经病毒，主要引起儿童手足口病，严重时可导致神经系统并发症，如急性弛缓性麻痹、脑干脑炎和神经源性肺水肿（Neurogenic Pulmonary Oedema, NPE）。尽管已有多种动物模型用于研究EV-A71感染，但这些模型未能完全重现人类感染中的病理特征，尤其是NPE。因此，开发一种能够模拟人类EV-A71感染及其致命并发症的动物模型具有重要意义。
该研究的目的是开发一种临床真实的小鼠模型，以模拟EV-A71感染引起的NPE，并探讨其病理机制。通过这种模型，研究者希望更好地理解EV-A71的神经致病机制，并为潜在的治疗和预防策略提供实验基础。
研究流程包括以下几个主要步骤：
研究者通过在小鼠胚胎成纤维细胞（NIH/3T3）中连续传代，获得了两种适应小鼠的EV-A71病毒株（EV71:TLLM和EV71:TLLMV）。这些病毒株在小鼠和灵长类细胞中均能高效复制，并在基因组中积累了多个非同义突变，特别是在衣壳蛋白（VP1）和RNA依赖的RNA聚合酶（3D）基因中。其中，VP1蛋白中的三个氨基酸替换（K98E、E145A和L169F）被证明能够使病毒利用小鼠细胞中表达的SCARB2蛋白，从而促进病毒感染。
研究者将1周龄的BALB/c小鼠通过腹腔注射（i.p.）或肌肉注射（i.m.）接种不同剂量的EV71:TLLM和EV71:TLLMV病毒株，观察小鼠的临床表现和生存率。结果显示，EV71:TLLMV病毒株的致死率最高，特别是在腹腔注射后，小鼠表现出严重的神经系统症状和呼吸窘迫。
研究者对感染小鼠的肺和脑组织进行了组织病理学和免疫组织化学分析。结果显示，表现出呼吸窘迫的小鼠（Class-IA）的肺组织重量增加，肺组织不完全塌陷，肺泡腔内有蛋白性液体和红细胞积聚。血清中儿茶酚胺水平显著升高，表明NPE的发生。此外，脑组织的病毒抗原分布和病理损伤主要集中在脑干和脊髓的特定区域，特别是延髓的孤束核（NTS）和最后区（AP），这些区域被认为是NPE的触发区。
研究者通过Kaplan-Meier生存曲线、Mann-Whitney检验和t检验等统计方法，分析了不同病毒株、接种途径和年龄对小鼠感染严重程度的影响。结果表明，EV71:TLLMV病毒株在1周龄小鼠中通过腹腔注射引起的疾病最为严重，且该模型能够重现人类EV-A71感染的多种病理特征，包括NPE。
研究的主要结果包括： - 病毒株的适应与优化：成功开发了两种适应小鼠的EV-A71病毒株，特别是EV71:TLLMV，其在小鼠中表现出高致死率和NPE。 - 小鼠模型的建立：1周龄BALB/c小鼠通过腹腔注射EV71:TLLMV后，表现出严重的神经系统症状和呼吸窘迫，肺组织病理学特征与NPE一致。 - 病理机制：脑干特定区域的病毒抗原分布和病理损伤与NPE的发生密切相关，血清中儿茶酚胺水平的升高进一步支持了NPE的神经源性机制。
该研究成功开发了一种临床真实的小鼠模型，能够模拟EV-A71感染引起的NPE。该模型不仅重现了人类感染中的多种病理特征，还为研究EV-A71的神经致病机制提供了重要工具。此外，该模型还可用于评估潜在的治疗和预防策略，具有重要的科学和应用价值。
研究还探讨了EV-A71病毒在小鼠中的感染动态，包括病毒在不同组织中的分布和复制情况。此外，研究者还提出了未来研究方向，如进一步探讨EV-A71病毒在脑干特定区域的细胞嗜性，以及SCARB2和PSGL-1受体在神经致病机制中的作用。
该研究为EV-A71感染的病理机制研究提供了重要工具，并为开发新的治疗和预防策略奠定了基础。