本研究的作者为尹繁兴，学号22130013，指导教师为韩彦槊，所属学科专业为生物学。该研究由大连理工大学（Dalian University of Technology）完成，并于2024年5月30日进行答辩。
主动脉夹层（Aortic Dissection, AD）是一种致命的血管疾病，其特征是主动脉壁的内膜撕裂，血液进入中膜形成假腔。AD的发病机制复杂，涉及炎症反应、血管平滑肌细胞（Smooth Muscle Cell, SMC）功能异常及表观遗传调控。近年来，RNA的N6-甲基腺苷（m6A）修饰在心血管疾病中的作用逐渐受到关注，但其在AD中的具体机制尚不明确。
本研究聚焦于m6A阅读蛋白YTHDC1，探讨其在AD中的作用机制。YTHDC1能够识别m6A修饰的mRNA，调控其核输出、剪接及表达。AD的两大病理特征是：
1. 巨噬细胞极化失衡：促炎型M1巨噬细胞浸润增加，而抗炎型M2巨噬细胞减少，导致血管炎症加剧。
2. 平滑肌细胞损伤：SMC的增殖能力下降，削弱了血管壁的修复能力。
研究目标包括：
1. 通过生物信息学筛选AD中关键的m6A调控因子；
2. 验证YTHDC1在AD组织中的表达模式；
3. 探究YTHDC1对巨噬细胞极化和SMC增殖的调控机制。
数据来源：从GEO数据库获取三个数据集（GSE52093、GSE153434、GSE147027），涵盖AD和正常主动脉组织的mRNA表达谱及m6A甲基化数据。
分析方法：
- 差异表达分析：使用R包“limma”筛选差异表达的m6A调控因子，发现YTHDC1在AD组织中显著下调。
- 功能富集分析：通过DAVID数据库对YTHDC1靶基因进行GO和KEGG分析，显示其富集于翻译和细胞分裂通路。
- ceRNA网络构建：基于Starbase和miRDB数据库，预测miR-16-5p可能靶向调控YTHDC1。
- 免疫浸润分析：使用CIBERSORTx估算免疫细胞比例，发现YTHDC1与巨噬细胞浸润显著相关。
样本：AD患者和健康对照的主动脉组织。
实验方法：
- 组织染色：H&E染色、EVG（弹性纤维染色）和Masson染色显示AD组织的形态学改变（如中膜撕裂、胶原沉积）。
- 蛋白表达检测：Western blot和免疫组化（IHC）证实YTHDC1在AD组织中表达下调；免疫荧光（IF）定位显示YTHDC1主要在血管中膜浸润性表达。
巨噬细胞极化机制：
- 模型构建：用LPS/IFN-γ诱导M1型极化，IL-4诱导M2型极化。
- YTHDC1沉默：通过siRNA敲低YTHDC1后，qPCR检测M2标志物（如Arg-1、IL-10）表达下降，Transwell实验显示巨噬细胞侵袭能力减弱，ROS水平升高。
平滑肌细胞机制：
- miR-16-5p调控验证：双荧光素酶报告基因实验证实miR-16-5p直接抑制YTHDC1表达。
- 功能实验：使用antagomir-16-5p抑制miR-16-5p后，SMC迁移和增殖能力增强；而联合si-YTHDC1可逆转这一效应。
AD造模：通过Ang-II灌注构建小鼠AD模型。
干预效果：注射antagomir-16-5p显著降低AD发生率，证实miR-16-5p/YTHDC1轴的治疗潜力。
本研究首次揭示YTHDC1通过双重机制参与AD发生：
1. 免疫调控：YTHDC1下调导致巨噬细胞M2极化受阻，促炎微环境加剧血管损伤。
2. 细胞修复：miR-16-5p/YTHDC1轴抑制SMC增殖，削弱血管壁修复能力。
科学价值：为AD的病因学提供了新的表观遗传视角，提示YTHDC1可能作为诊断标志物或治疗靶点。
应用价值：antagomir-16-5p的干预效果为AD的药物开发提供了新思路。
研究还提示氧化应激（ROS）可能通过m6A修饰参与AD进程，为后续研究提供了方向。