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医学相关微生物生物膜的电位、电流和无线检测

期刊:Biosensors and BioelectronicsDOI:10.1016/j.bios.2023.115892

这篇文档属于类型a,即报告了一项原创性研究。以下是针对该研究的学术报告:


作者及机构

本研究由Pannawich Thirabowonkitphithan(瑞典马尔默大学、泰国朱拉隆功大学)、Rokas Žalnėravičius(立陶宛维尔纽斯大学)、Atefeh Shafaat(马尔默大学)等多名学者合作完成,通讯作者为Rokas ŽalnėravičiusWanida Laiwattanapaisal。研究发表于期刊Biosensors and Bioelectronics(2024年卷246期,文章编号115892),在线发布于2023年11月30日。


学术背景

研究领域:本研究属于微生物电化学与生物传感器交叉领域,聚焦于医学相关微生物生物膜(biofilm)的电活性及其检测技术。

研究动机
1. 临床需求:超过80%的感染与生物膜相关(如慢性伤口、导管感染),但现有检测方法(如培养法、生化测试)耗时长且依赖专业人员,亟需快速、便携的检测技术。
2. 科学问题:微生物生物膜具有电活性(electrogenicity),可通过电化学信号(如开路电位OCP、电流)反映其形成过程,但多物种生物膜的协同电活性机制尚不明确。
3. 技术瓶颈:现有电化学生物膜传感器尚未实现无线化,限制了临床转化。

研究目标
1. 量化单物种及多物种生物膜的电化学特性(OCP、电流密度);
2. 验证多物种生物膜中微生物共享电子介体(redox mediators)的协同效应;
3. 开发基于近场通信(NFC)技术的无线、无芯片生物膜检测方法。


研究流程与实验方法

1. 生物膜培养与电化学检测

  • 研究对象
    • 单物种:革兰阳性菌(*Staphylococcus aureus*、*Streptococcus gordonii*)、革兰阴性菌(*Pseudomonas aeruginosa*、*Escherichia coli*)、酵母菌(*Candida albicans*);
    • 多物种:*S. aureus*与*P. aeruginosa*共培养(比例10:1)。
  • 电极系统:玻碳电极(glassy carbon electrode, GCE)作为生物膜宿主电极(bioanode),Ag/AgCl电极作为参比/对电极。
  • 实验方法
    • 电位监测(OCP):记录生物膜形成过程中GCE的电位变化(24小时)。
    • 电流密度测量:通过外接电阻(100 kΩ)计算生物膜产生的电流与功率密度。
    • 显微镜验证:扫描电镜(SEM)和共聚焦显微镜(CM)观察生物膜形貌及覆盖率。

2. 多物种协同机制验证

  • 关键实验:将*S. aureus*生物膜电极转移至*P. aeruginosa*培养滤液,监测OCP变化,证明*S. aureus*可利用*P. aeruginosa*分泌的电子介体(如吩嗪类化合物)。
  • 对照实验:无菌培养基中电极电位保持稳定,排除pH干扰(pH变化仅导致±59 mV波动)。

3. 无线传感器开发

  • 设计原理
    • 将NFC标签天线部分替换为AgCl层(高电阻),连接生物膜宿主电极;
    • 生物膜电流还原AgCl为Ag(低电阻),改变天线阻抗,通过反射系数(|S11|)无线检测阻抗变化。
  • 验证步骤
    • 生物膜形成后,AgCl层电阻从>1 kΩ降至<100 Ω;
    • 天线谐振频率从19.78 MHz降至15.76 MHz,证实无线检测可行性。

主要结果

  1. 单物种生物膜电活性差异
    • *P. aeruginosa*生物膜OCP最低(-200 mV vs Ag/AgCl),电流密度最高(1.3×10⁻⁶ A/cm²);
    • *S. aureus*电活性较弱(OCP -90 mV,电流密度0.9×10⁻⁷ A/cm²)。
  2. 多物种协同效应
    • *S. aureus*与*P. aeruginosa*共培养生物膜的OCP达-250 mV,电流密度(1.6×10⁻⁶ A/cm²)高于单物种,证实电子介体共享。
  3. 无线检测验证
    • AgCl层电阻降低与生物膜电流生成同步,|S11|频率偏移可无线识别生物膜形成。

结论与价值

  1. 科学意义
    • 首次揭示多物种生物膜通过共享电子介体增强电活性的协同机制;
    • 为临床多微生物感染检测提供电化学理论基础。
  2. 技术价值
    • 开发首例无芯片、无电池的无线生物膜传感器,简化检测流程;
    • 潜在应用场景:集成于伤口敷料、导管等医疗设备,实现实时感染监测。

研究亮点

  1. 创新发现:多物种生物膜的电活性协同效应;
  2. 方法创新:基于NFC的无线检测设计,避免复杂仪器依赖;
  3. 临床导向:针对慢性伤口常见病原菌(如*S. aureus*和*P. aeruginosa*)优化检测策略。

其他价值

  • 数据公开性:研究数据可通过请求获取,支持后续研究复现;
  • 跨学科合作:结合微生物学、电化学与无线传感技术,为生物膜研究提供新范式。

(全文约2000字)

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