本研究由Peng Huang、Xuecheng Yu、Zengxiang Gao等学者共同完成，作者单位包括湖北中医药大学药学院（College of Pharmacy, Hubei University of Chinese Medicine）、湖北省时珍实验室（Hubei Shizhen Laboratory）及中医药现代化肝病研究中心（Center of Traditional Chinese Medicine Modernization for Liver Diseases）。研究成果发表于2025年的《Journal of Ethnopharmacology》（Volume 348, Article 119889）。
学术背景
该研究聚焦于肝脏缺血再灌注损伤（hepatic ischemia-reperfusion injury, HIRI）的病理机制及中药干预策略。HIRI是肝切除、移植等手术中不可避免的并发症，其核心机制涉及活性氧（ROS）积累、炎症反应和铁死亡（ferroptosis）。参附注射液（Shenfu Injection, SF）源自宋代《济生方》中的参附汤，由红参（Ginseng Radix et Rhizoma Rubra）和附子（Aconiti Lateralis Radix Preparata）组成，临床用于休克、脓毒症等疾病的治疗，但其抗HIRI的药理机制尚未明确。本研究旨在通过网络药理学结合体内外实验，揭示SF通过JAK2/STAT3通路调控铁死亡改善HIRI的作用机制。
研究流程与方法
成分分析与网络药理学
- 成分鉴定：采用UHPLC-Q Exactive HFX技术分析SF的化学成分，鉴定出773种化合物，包括人参皂苷Rg1、乌头碱等（表2）。
- 靶点预测：通过TCMSP和BATMAN-TCM数据库筛选SF的51种活性成分及574个潜在靶点，与GeneCards数据库中的2640个HIRI相关靶点取交集，获得257个共同靶点（图6a）。
- 网络构建：利用Cytoscape构建“药物-成分-靶点-疾病”网络（图6b），并通过STRING数据库构建蛋白互作（PPI）网络，筛选出AKT1、IL-1β、STAT3等33个核心靶点（图6c）。
- 通路富集：KEGG分析显示JAK2/STAT3通路显著富集（图6g），分子对接证实人参皂苷Rg5、Rg1等与JAK2/STAT3结合能低于-6 kcal/mol（图6i-k）。
体内实验验证
- 动物模型：C57BL/6J小鼠随机分为假手术组（Sham）、缺血再灌注组（I/R）、SF低中高剂量组（2.5/5/10 mL/kg）及JAK2抑制剂AG490组（40 mg/kg），每组6只。通过夹闭肝动脉60分钟诱导HIRI，再灌注6小时后取样（图2）。
- 指标检测：
- 肝功能：SF显著降低血清ALT、AST水平（图2a-b）。
- 炎症反应：SF下调TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表达（图2c-e），减少MPO阳性细胞（图2h-i）。
- 氧化应激与铁死亡：SF降低ROS、MDA和铁离子水平，提升SOD、GSH活性及GPX4蛋白表达（图3, 图5a-f）。
体外实验验证
- 细胞模型：AML12细胞经氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）模拟HIRI，SF预处理（2.5-10 μL/mL）显著提高细胞存活率（图4b-c）。
- 机制验证：SF抑制OGD/R诱导的JAK2/STAT3磷酸化（图7d-f），上调GPX4、SLC7A11表达，下调PTGS2（图5g-l）。
主要结果
- SF改善HIRI的病理损伤：SF减轻肝组织充血坏死（图2f-g），降低炎症因子和氧化应激标志物（图2-3）。
- 抑制铁死亡：SF通过上调GPX4和SLC7A11、下调PTGS2，减少脂质过氧化和铁积累（图5）。
- JAK2/STAT3通路调控：SF抑制JAK2/STAT3磷酸化，其活性成分（如人参皂苷Rg5）与靶点结合稳定（图6i-k, 图7）。
结论与价值
本研究首次阐明SF通过JAK2/STAT3通路抑制铁死亡，从而缓解HIRI的分子机制。其科学价值在于：
1. 理论创新：揭示了SF多成分-多靶点-多通路的协同作用，为中药复方机制研究提供范式。
2. 应用潜力：SF或可成为肝移植术中减轻HIRI的候选药物，尤其适用于需调控铁死亡的临床场景。
研究亮点
- 方法整合：结合网络药理学、分子对接及体内外实验，系统性验证SF的作用机制。
- 靶点新颖性：首次发现SF通过JAK2/STAT3-GPX4轴调控铁死亡。
- 转化意义：为SF的临床适应症拓展提供实验依据，推动中药现代化研究。
其他价值
研究局限性包括未明确SF中具体起效成分，且HIRI涉及的其他通路（如PI3K/AKT）未被探讨，未来需进一步解析。