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作者与机构
该研究由Maggie Roth作为主要作者完成，其所属机构为俄勒冈州立大学（Oregon State University）。该研究是Maggie Roth为完成生物资源研究学士学位（Bioresource Research, Biotechnology Option）所提交的本科论文。研究得到了俄勒冈州立大学动物与牧场科学系的Cecily V. Bishop和Timothy Hazzard，以及生物资源研究主任Katharine G. Field的批准。研究于2022年11月21日提交。
学术背景
该研究的主要科学领域为生殖生物学，特别是针对女性不孕症的研究。不孕症是全球数百万女性面临的问题，但其病因尚未完全明确，且现有治疗方法往往效果有限。抗缪勒管激素（Anti-Mullerian Hormone, AMH）和激活素A（Activin A）是两种与卵泡发育相关的卵巢激素，被认为可能与卵泡质量相关，但其在预测灵长类动物妊娠结局中的作用尚未得到充分研究。因此，该研究旨在利用非人灵长类动物（如恒河猴）作为模型，评估AMH和激活素A在自然交配情境下预测妊娠结局的能力。研究的主要目标是确定这两种激素是否能够作为预测妊娠成功的可靠生物标志物。
研究流程
研究分为以下几个主要步骤：
实验对象与样本收集
研究选取了47只自然周期的雌性恒河猴（Macaca mulatta），年龄范围为6.3至17.7岁，平均年龄为13岁，体重范围为5.35至10千克，平均体重为7.35千克。这些猴子来自俄勒冈国家灵长类研究中心（ONPRC）的SPF4繁殖群体。研究采用回顾性、非随机、队列分析的方法，对90个定时交配繁殖（Timed-Mated Breeding, TMB）周期的数据进行了分析。
激素监测与交配
每天从月经后第7天开始采集血液样本，直至雌猴的雌二醇（Estradiol, E2）水平表明即将排卵。此时，雌猴与有生育能力的雄猴进行配对交配（TMB）。如果未成功受孕，雌猴会在繁殖季节内重新配对。血液样本经离心后提取血清，用于测定E2和孕酮（Progesterone, P4）水平，以监测排卵和黄体化过程。妊娠状态通过超声波在胚胎第30天左右确定。
AMH和激活素A的测定
在每个TMB周期中，首次采集的血液样本（通常在月经后第5至15天）用于测定血清中的AMH和激活素A水平。研究使用经过验证的酶联免疫吸附测定（ELISA）方法（Ansh Labs）进行激素测定。AMH和激活素A的浓度通过标准曲线计算，并使用OriginPro 2019软件进行数据分析。
数据分析
使用SAS软件进行线性回归分析，评估AMH和激活素A与妊娠状态之间的关系，并检测AMH与年龄、体重之间的相关性。统计显著性设定为p<0.05。
主要结果
研究得出以下主要结果：
AMH与妊娠状态的关系
研究未发现AMH水平与妊娠状态之间存在显著差异（p=0.46）。此外，仅对15岁及以下的年轻猴子进行分析时，AMH水平与妊娠状态之间仍无显著差异（p=0.25）。
激活素A与妊娠状态的关系
激活素A水平与妊娠状态之间亦无显著差异（p=0.38）。然而，在成功受孕的猴子中，激活素A与体重之间存在显著的负相关（r=-0.38, p=0.047），但这一结果可能受到两个极端异常值的影响。
AMH与年龄、体重的关系
AMH水平与年龄（r=-0.32, p=0.002）和体重（r=-0.22, p=0.036）均呈显著负相关，这与人类和其他模型物种的研究结果一致。
结论
该研究表明，在自然交配情境下，AMH和激活素A均不能作为预测恒河猴妊娠成功的可靠生物标志物。这一发现对现有临床实践中AMH作为卵巢储备标志物的应用提出了质疑。尽管AMH在辅助生殖技术（ART）中具有一定预测价值，但在自然生育情境下，其预测能力可能有限。此外，激活素A在妊娠预测中的作用仍需进一步研究。
研究亮点
1. 研究首次在恒河猴模型中系统评估了AMH和激活素A在自然交配情境下预测妊娠结局的能力。
2. 研究结果挑战了AMH作为卵巢储备标志物的普遍适用性，特别是在自然生育情境下的预测价值。
3. 研究揭示了AMH与年龄、体重之间的显著负相关，为理解卵巢衰老和肥胖对生殖功能的影响提供了新的视角。
其他有价值的内容
研究还指出，样本采集时间（月经后第7天）可能影响了AMH和激活素A的测定结果，因为这两种激素在月经周期早期达到峰值。未来研究应考虑在月经后第1至3天采集样本，以更准确地评估激素水平。此外，研究样本量较小（47只猴子），可能限制了结果的统计效力。未来研究应扩大样本量，并进一步探索AMH和激活素A在辅助生殖技术中的应用价值。
以上为该研究的详细报告，旨在为相关领域的研究者提供全面的参考。