学术报告：首例猫源犬小孢子菌对特比萘芬耐药性的发现

作者及发表信息
本研究由Yun-Hsia Hsiao（亚洲兽医专科转诊中心，台湾）、Charles Chen（同机构）、Hock Siew Han（马来西亚柔佛州）及Rui Kano（日本大学生物资源科学学院）共同完成，成果于2018年4月16日发表于《The Journal of Veterinary Medical Science》（DOI: 10.1292/jvms.17-0680）。

学术背景
犬小孢子菌（*Microsporum canis*）是全球猫皮肤病最常见的病原体，传统治疗依赖唑类（如伊曲康唑）和烯丙胺类（如特比萘芬）抗真菌药物。尽管其他真菌（如曲霉菌、念珠菌）的耐药性已有报道，但犬小孢子菌对特比萘芬的耐药性此前未被记录。本研究旨在报告首例特比萘芬耐药犬小孢子菌的临床病例，并探讨其耐药机制及治疗策略。

研究流程与实验方法
1. 病例发现与初步诊断
- 研究对象：一只2岁异国短毛猫，长期表现为躯干脱毛和鳞屑，曾接受1%特比萘芬外用喷雾治疗3个月无效。
- 诊断方法：
- 伍德灯检查：毛发呈现典型苹果绿色荧光。
- 毛发镜检：发现透明孢子（2.5×3.5 μm），符合外发癣菌感染特征。
- 培养与分子鉴定：通过皮肤癣菌测试培养基（DTM）和沙氏葡萄糖琼脂培养，结合内部转录间隔区（ITS）序列分析（99%同源性比对NCBI数据库），确认病原体为犬小孢子菌。

1. 耐药性检测

   • 伊曲康唑（Itz）敏感性：采用E-test梯度条带法，最小抑菌浓度（MIC）为0.023 μg/mL，判定为敏感。
     
   • 特比萘芬（Trf）耐药性：基于CLSI M38-A2标准改良的肉汤微量稀释法，MIC >32 μg/mL，判定为耐药。
     
   • 质量控制：使用标准菌株Candida parapsilosis ATCC22019验证实验准确性。
     

2. 治疗方案与疗效评估

   • 治疗：改用伊曲康唑（10 mg/kg/天，口服）治疗3个月。
     
   • 疗效监测：每3周进行真菌培养，第6周首次转阴，后续培养均为阴性（图2）。治疗后12个月无复发（图1b）。
     

主要结果
1. 耐药性数据：分离菌株对特比萘芬的MIC >32 μg/mL，远高于耐药阈值，而对伊曲康唑保持高敏感性（MIC 0.023 μg/mL）。
2. 治疗验证：伊曲康唑的临床疗效与体外MIC结果一致，证实耐药性检测的可靠性。
3. 机制推测：作者提出耐药性可能与ATP结合盒（ABC）转运蛋白基因（如*PDR1*、*MDR2*）过表达或角鲨烯环氧化酶（SQLE）基因突变相关，但需进一步验证。

结论与意义
1. 科学价值：首次证实犬小孢子菌可对特比萘芬产生耐药性，为兽医临床抗真菌治疗敲响警钟。
2. 应用价值：推荐对治疗无效病例进行MIC检测，并优先选择唑类药物（如伊曲康唑）。
3. 耐药机制启示：需深入研究ABC转运蛋白或SQLE基因突变在犬小孢子菌耐药中的作用。

研究亮点
- 创新性：全球首例猫源犬小孢子菌特比萘芬耐药报告。
- 方法学：结合传统培养、分子鉴定（ITS测序）及标准化药敏试验（CLSI改良法）。
- 临床指导性：通过MIC检测指导用药，避免经验性治疗的盲目性。

其他价值
研究得到日本文部科学省（MEXT）资助，凸显国际合作在耐药性监测中的重要性。病例图片与培养结果（图1、2）为临床诊断提供了直观参考。

未来方向
需扩大样本量以明确耐药菌株的流行率，并通过基因组学解析耐药基因的分子机制。