口腔扁平苔藓患者颊黏膜中唾液链球菌的改变及其治疗的临床试验研究

作者及机构
本研究由同济大学口腔医学院口腔医学系、上海市牙组织修复与再生工程技术研究中心的Yuting Li、Fangyang Shao、Saiwei Zheng、Zhengwu Tan和Yuan He团队完成，发表于*Probiotics and Antimicrobial Proteins*期刊，2020年由Springer Nature出版。

学术背景
口腔扁平苔藓（Oral Lichen Planus, OLP）是一种T细胞介导的慢性炎症性黏膜疾病，病因不明，临床表现为反复糜烂和疼痛，严重影响患者生活质量。世界卫生组织（WHO）于2005年将其列为潜在恶性口腔疾病（OPMD）。目前治疗手段有限，局部糖皮质激素（如曲安奈德）是首选，但长期使用可能导致念珠菌感染，且部分患者疗效不佳。近年来，微生物组研究发现，口腔菌群失衡可能与OLP的免疫失调相关。前期研究显示，OLP患者口腔中链球菌属（*Streptococcus*）比例显著降低，但具体菌种尚不明确。唾液链球菌（*Streptococcus salivarius*）是口腔共生菌，其益生菌株K12已用于咽喉炎等疾病的防治。本研究旨在探究：（1）OLP患者颊黏膜中唾液链球菌的丰度变化；（2）其通过抑制NF-κB通路的抗炎机制；（3）唾液链球菌K12含片治疗OLP的临床效果。

研究流程
1. 样本收集与菌群分析
- 研究对象：43例OLP患者（20例糜烂型，23例非糜烂型）和48例健康对照。
- 方法：空腹漱口后，用无菌棉签采集颊黏膜样本，提取DNA后通过实时定量PCR（RT-PCR）检测唾液链球菌的相对丰度。引物设计基于葡萄糖基转移酶（*gtf*）基因，以16S rRNA为内参。

1. 体外抗炎实验

   • 细胞模型：人舌鳞癌细胞系HSC-3（模拟OLP炎症环境）。
     
   • 处理：使用唾液链球菌ATCC® BAA-2593™的培养上清液（0.1%浓度）刺激HSC-3细胞6小时，检测炎症因子（IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α）的mRNA表达水平。
     

2. 临床试验设计

   • 分组：40例症状性OLP患者随机分为两组，A组（20例）使用0.1%曲安奈德口腔膏，B组（20例）使用唾液链球菌K12含片（含≥1亿CFU/片），疗程4周。
     
   • 评估指标：
     
     • 体征评分（Sign scores）：根据病变范围和白纹/糜烂面积分级（1-5分）。
       
     • 疼痛评分（VAS）：视觉模拟量表记录疼痛改善百分比。
       
     • 唾液链球菌丰度：治疗前后RT-PCR检测。
       

主要结果
1. 菌群分析
OLP组唾液链球菌丰度显著低于健康对照组（p=0.041），提示菌群失衡可能与疾病相关。

1. 体外机制
   0.1%细菌上清液处理后，HSC-3细胞中IL-6表达显著降低（p<0.001），IL-1β、IL-8和TNF-α呈下降趋势（未达显著性）。表明唾液链球菌可能通过抑制NF-κB通路调控炎症反应。

2. 临床疗效

   • 两组治疗后体征评分和VAS评分均显著下降（p<0.05），组间无统计学差异。
     
   • B组唾液链球菌丰度提升更明显，证实益生菌可定植口腔并恢复微生态平衡。
     
   • 无不良反应报告，安全性良好。
     

结论
本研究首次证实：（1）OLP患者颊黏膜中唾液链球菌丰度降低；（2）其培养上清液可通过抑制NF-κB通路减轻炎症；（3）唾液链球菌K12含片治疗OLP的短期疗效与糖皮质激素相当，且具有长期应用的潜力。为OLP的微生态调节治疗提供了新思路。

研究亮点
1. 创新性：首次将益生菌K12用于OLP治疗，并揭示其通过NF-κB通路调控免疫平衡的机制。
2. 临床转化价值：唾液链球菌K12含片可作为糖皮质激素的替代或补充方案，尤其适合长期管理。
3. 方法学严谨性：结合分子生物学（RT-PCR）、细胞实验和随机对照试验（RCT），多维度验证假说。

局限性与展望
样本量较小且观察期较短，未来需扩大样本并延长随访，进一步优化益生菌剂量和使用方案。此外，链球菌属其他菌种在OLP中的作用仍有待探索。