该文档属于类型a，是一篇关于苦木素类化合物抗摄食活性研究的原创性学术论文。以下是针对该研究的详细学术报告：

一、作者及发表信息
本研究由沈阳药科大学传统中药材料学院的Bensong Xin、Fuxin Hu、Qing Wang、Bin Lin、Xiaoxiao Huang*（通讯作者）和Shaojiang Song*（通讯作者）合作完成，发表于Journal of Agricultural and Food Chemistry，接收日期为2025年10月27日，DOI编号为10.1021/acs.jafc.5c07997。

二、学术背景
1. 研究领域：天然产物化学与农业害虫防治。
2. 研究动机：小菜蛾（*Plutella xylostella*）是全球十字花科蔬菜的主要害虫，对化学杀虫剂抗性日益增强，亟需开发高效、低抗性的植物源农药。
3. 背景知识：苦木素类（Quassinoids）是一类源自苦木科植物的三萜衍生物，具有杀虫、抗肿瘤和抗炎等多种生物活性。然而，传统分离方法效率低，且苦木素与常规三萜共洗脱问题突出。
4. 研究目标：通过整合分子网络（Molecular Networking）、MZmine数据处理和DeepMass注释技术，从中国苦木（*Picrasma chinensis*）中高效发现新型苦木素，并评估其抗摄食活性，为植物源农药开发提供化学基础。

三、研究流程
1. 样品制备与分离
- 植物材料：采集中国苦木枝叶，70%乙醇回流提取，经正丁醇分配后硅胶柱层析，得4个组分（Fr. A-D）。Fr. B通过HP-20和ODS柱进一步分离为Fr. B1-B3。
- 分子网络分析：使用MZmine 3.8.9处理质谱数据，上传至GNPS平台进行特征分子网络分析，结合DeepMass注释未知簇。结果显示，红色簇为苦木素类，主要富集于Fr. B2-B3。

1. 化合物鉴定

   • 结构解析：从Fr. B2-B3中分离得到6个新苦木素（1-6）和13个已知苦木素（7-19），通过核磁共振（NMR）、高分辨质谱（HRESIMS）、量子化学计算（ECD计算）确定绝对构型。
     
   • 代表性新化合物：
     
     • Picrasmaen A (1)：分子式C27H30O7，通过HMBC和NOESY确定其2S,4R,5S,7R,8R,9S,10S,14R构型。
       
     • Picrasmaen F (6)：分子式C37H40O13，通过DP4+概率分析（100%）和ECD计算确定3S构型。
       

2. 抗摄食活性评估

   • 实验方法：采用叶盘法，以200 μg/mL浓度测试化合物对小菜蛾幼虫的拒食率，以印楝素A（Azadirachtin）为阳性对照（拒食率97.9%）。
     
   • 活性数据：化合物6、8、12表现显著活性，拒食率分别为72.1±0.7%、82.8±0.5%、83.7±0.5%。
     

3. 酪氨酸酶抑制活性与分子对接

   • 酶活测试：化合物6、8、12对酪氨酸酶的IC50分别为55.2±1.2 μM、36.2±0.8 μM、64.3±2.7 μM。
     
   • 分子对接：化合物8与酪氨酸酶（PDB 2Y9X）结合能为-7.7 kcal/mol，关键相互作用包括His85氢键和Arg268盐桥。
     

四、主要结果
1. 新化合物发现：首次报道6个苦木素（1-6），其中化合物6具有罕见的C-3羟基取代结构。
2. 活性筛选：化合物8（Picrasjavacin K）和12（Picralactone C）活性最佳，结构-活性关系（SAR）表明C-12/C-13双键降低活性，而大位阻取代基增强活性。
3. 作用机制：活性化合物通过抑制酪氨酸酶干扰小菜蛾的体壁硬化过程，导致摄食抑制。

五、结论与价值
1. 科学价值：
- 验证了DeepMass在未知天然产物注释中的优势，其准确度超越传统工具（如SIRIUS）。
- 为苦木素类化合物的靶向分离提供了高效策略。
2. 应用价值：活性化合物6、8、12可作为新型植物源农药的先导分子。

六、研究亮点
1. 方法创新：首次整合MZmine-GNPS-DeepMass技术流程，解决了复杂体系中苦木素的注释难题。
2. 结构新颖性：化合物1-6具有独特的C-2苯甲酰基或C-12乙酰基修饰。
3. 跨学科应用：将计算化学（ECD、DP4+）与生物活性筛选结合，加速了天然农药开发。

七、其他价值
- 补充材料中提供了所有化合物的NMR数据及分子对接细节，为后续研究提供参考。
- 研究得到国家自然科学基金（U22A20381）和辽宁省科技计划（2024-ms-086）资助。

该研究通过多学科技术融合，不仅拓展了苦木素的结构多样性，也为农业害虫防治提供了新思路。