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类型：文献全文
标题：佛手柑内酯对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠的疗效观察
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发布时间：2026-06-03 15:59:54
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佛手柑内酯对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠的疗效观察

学术研究报告：佛手柑内酯对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠模型的治疗作用

一、 研究团队与发表信息

本研究的主要作者为赵文佳、朱剑平、胡佳宁和袁干军，通讯作者为袁干军。作者单位均隶属于江西农业大学，具体包括生物技术药物研发工程中心以及生物科学与工程学院。该研究成果以《佛手柑内酯对DSS诱导溃疡性结肠炎小鼠的疗效观察》为题，发表于《中国抗生素杂志》(Chinese Journal of Antibiotics)。论文的收稿日期为2025年12月3日，并于2026年6月3日进行了网络首发，其数字对象唯一标识符（DOI）为10.13461/j.cnki.cja.008180。该研究得到了国家自然科学基金（项目号：81960636）的资助。

二、 研究背景与目的

本研究属于药理学与天然产物药物开发领域，具体聚焦于炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease, IBD）的治疗药物探索。溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis, UC）是一种慢性、复发性、非特异性的结肠黏膜炎症性疾病，临床表现为腹泻、黏液脓血便和腹痛，严重影响患者生活质量。当前临床一线药物如5-氨基水杨酸、糖皮质激素、免疫抑制剂及生物制剂，虽能控制病情，但长期使用存在激素依赖、感染风险增加及多种不良反应等问题，且对于难治性或出现严重并发症的患者，最终仍需手术切除病变肠段。因此，从天然产物中寻找安全、有效且可长期应用的新型治疗药物，已成为该领域的重要研究方向。

香豆素类化合物因其广泛的抗炎、抗菌、免疫调节等生物活性而备受关注。佛手柑内酯（Bergapten, BP）是一种广泛存在于佛手柑、枳实、柠檬等药用植物中的呋喃香豆素类化合物。已有前期研究提示，佛手柑来源的多糖以及BP本身（在乙酸诱导的大鼠结肠炎模型中）展现出一定的抗结肠炎潜力。然而，关于BP在国际公认的葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium, DSS）诱导的UC小鼠模型中进行系统、全面的药效学评价的研究尚不充分，这限制了其作为抗UC候选药物的深入开发。

基于此背景，本研究旨在系统评估佛手柑内酯（BP）对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型的治疗作用。研究目标明确：通过建立DSS诱导的UC小鼠模型，观察不同剂量BP干预对小鼠一般状态、疾病活动指数、结肠宏观形态及组织病理学的影响，从而明确BP的抗UC药效，并确定其有效剂量，为BP作为一种植物来源的潜在抗UC新制剂的开发提供坚实的实验依据。

三、 详细研究流程与方法

本研究的设计严谨，流程清晰，主要包含以下几个关键步骤：

  1. 实验动物与分组：研究选用60只SPF级雄性C57BL/6J小鼠（6周龄，体重18±2克）。经过一周适应性饲养后，采用随机数字法将小鼠均分为6组，每组10只。分组设置如下：

    • 空白对照组（CON）：正常饮水，不造模，每日灌胃等体积的0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液。
    • 模型组（DSS）：自由饮用3% DSS溶液以诱导UC模型，每日灌胃等体积的0.5% CMC-Na溶液。
    • 阳性药物对照组（SASP）：自由饮用3% DSS溶液造模，每日灌胃给予400 mg/kg的柳氮磺吡啶（SASP）混悬液。
    • BP治疗组：自由饮用3% DSS溶液造模，同时每日分别灌胃给予低（5 mg/kg）、中（10 mg/kg）、高（20 mg/kg）三个剂量的BP溶液。

  2. UC模型建立与药物干预：除CON组外，其余各组小鼠均通过连续7天自由饮用3%（w/v）的DSS溶液来建立UC模型。从造模第一天起，各治疗组同步开始每日一次的灌胃给药干预，CON组和DSS组则灌胃等体积的溶剂（0.5% CMC-Na）。整个实验周期为7天。

  3. 药效学评价指标与数据收集：在为期7天的实验过程中，研究人员系统监测并记录了多项指标以综合评价BP的疗效：

    • 一般状态与疾病活动指数（Disease Activity Index, DAI）评分：每日观察并记录小鼠的体重、粪便性状（正常粪球至腹泻）和便血情况（通过邻甲苯胺法检测隐血）。根据预先制定的评分表（表1），将体重下降百分比、粪便性状和便血情况分别评分并相加，得到每日的DAI总分，用以量化疾病的严重程度。
    • 样本采集与宏观形态学评估：末次给药1小时后处死小鼠，分离结肠组织。首先测量结肠长度（从盲肠-结肠交界处至直肠末端），结肠缩短是UC的典型宏观病理特征。随后，沿肠系膜侧剪开结肠，冲洗内容物后，根据Cooper方法进行肉眼观察评分，即结肠黏膜损伤指数（Colon Mucosal Damage Index, CMDI）评分（0-4分），评估黏膜充血、溃疡、坏死及穿孔等情况。
    • 组织病理学分析：取同一位置的结肠组织片段，用4%多聚甲醛固定，随后进行石蜡包埋、切片和苏木精-伊红（H&E）染色。通过光学显微镜观察结肠黏膜的组织病理学变化，重点关注肠腺结构的完整性、上皮细胞的排列与脱落情况、结缔组织状态以及炎症细胞浸润程度。

  4. 数据分析方法：所有实验数据以平均值±标准差表示。采用SPSS Statistics 25软件进行统计分析。多组间比较使用单因素方差分析（ANOVA），若存在显著差异，则进一步采用Fisher‘s LSD检验进行两两比较。以P<0.05作为差异具有统计学意义的标准。最终使用GraphPad Prism 8软件进行图表绘制。

四、 主要研究结果及其逻辑关联

本研究获得了一系列相互印证、层次分明的结果，清晰地展示了BP对DSS诱导的UC小鼠的治疗效果。

  1. 对一般状态、体重和DAI评分的影响：与健康状态良好的CON组相比，DSS模型组小鼠出现了典型的UC症状：精神沉郁、活动减少、扎堆，并伴有严重的腹泻和便血。定量数据显示，DSS组小鼠的体重百分比显著下降，同时DAI评分急剧升高（P<0.01），证实模型成功建立且疾病严重。药物干预后，与DSS组相比，阳性药SASP以及中（10 mg/kg）、高（20 mg/kg）剂量BP治疗均能显著改善小鼠的一般状态，缓解便血和腹泻。具体数据上，10 mg/kg和20 mg/kg BP剂量组能显著逆转DSS引起的体重下降（P<0.01），并显著降低DAI评分（P<0.01）。其中，20 mg/kg BP剂量的改善效果最为显著。这一结果首先从整体动物行为学和综合疾病评分角度，证实了BP具有缓解UC症状的保护作用。

  2. 对结肠宏观形态的影响（结肠长度与CMDI评分）：宏观病理检查结果与上述行为学指标高度一致。DSS组小鼠结肠内可见暗红色血便，结肠长度显著短于CON组（P<0.01），CMDI评分显著升高（P<0.01），表明存在明显的黏膜损伤和溃疡。治疗后，阳性药SASP和高剂量BP（20 mg/kg）干预能显著增加结肠长度并降低CMDI评分（P<0.05）。这表明，BP（尤其是20 mg/kg剂量）能够有效减轻DSS引起的结肠缩短和黏膜肉眼可见的损伤，其效果与临床常用药SASP相当。此部分结果将疗效观察从整体症状推进到了器官水平的病理改变。

  3. 对结肠组织病理形态学的影响：组织病理学检查提供了微观层面的直接证据。CON组结肠黏膜结构完整，肠腺丰富，上皮细胞排列紧密，无炎症细胞浸润。与之形成鲜明对比，DSS组结肠组织呈现严重病理损伤：肠腺结构破坏、上皮细胞大量脱落、结缔组织排列紊乱，并伴有大量炎症细胞浸润以及组织坏死和出血。在治疗组中，5 mg/kg BP剂量改善作用有限。而10 mg/kg和20 mg/kg BP剂量组则显示出明确的保护作用，表现为上皮细胞脱落减少、肠腺结构排列趋于规整且数量有所恢复、炎症细胞浸润减轻。其中，20 mg/kg BP剂量的效果最为明显。这一结果从细胞和组织层面直接证实了BP能够减轻UC特征性的炎症浸润和组织破坏，修复黏膜结构。

结果的逻辑推进关系清晰：首先，通过DAI评分和体重变化证明了BP能改善疾病的整体临床表现；接着，通过结肠长度和CMDI评分证实了这种改善对应着器官宏观病理的修复；最后，通过H&E染色从微观病理学上揭示了修复的具体表现——即减轻炎症、保护上皮和恢复腺体结构。这三层证据环环相扣，由表及里，构成了支持BP有效性的完整证据链。

五、 研究结论与价值意义

本研究的结论明确：佛手柑内酯（BP）对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有显著的治疗作用，能够有效缓解结肠炎症及相关临床症状，且在所测试的剂量范围内，20 mg/kg为最佳有效剂量。

该研究的价值体现在以下几个方面：

  • 科学价值：首次在标准的DSS诱导UC小鼠模型中，系统评价了BP的药效，补充了香豆素类化合物抗UC活性的研究数据，为天然产物治疗炎症性肠病提供了新的实验证据和候选分子。
  • 应用价值：研究结果为将BP开发成为一种潜在的、植物来源的抗溃疡性结肠炎新药或先导化合物提供了关键的临床前药效学依据。研究确定的20 mg/kg有效剂量可为后续的剂量探索和药理毒理学研究提供参考。
  • 认知价值：研究通过多指标（体重、DAI、结肠长度、CMDI、组织病理）综合评价体系，全面展示了BP的治疗效果，加深了对BP药理作用的认识。

六、 研究亮点

本研究的亮点突出：

  1. 研究对象的明确性与新颖性：聚焦于天然香豆素单体化合物——佛手柑内酯（BP），针对其在主流DSS诱导UC模型中的药效进行系统评价，填补了该领域的研究空白。
  2. 严谨且多层次的研究设计：采用了从正常对照、疾病模型到阳性对照和多个剂量治疗组的完整实验设计。药效评价体系全面，涵盖了疾病活动度（DAI）、器官宏观病理（结肠长度、CMDI）和组织微观病理（H&E染色）三个层面，评价结果相互支撑，说服力强。
  3. 明确的量效关系：设置了5、10、20 mg/kg三个剂量组，结果清晰地显示出一定的剂量依赖性改善趋势，并明确指出了20 mg/kg为最佳有效剂量，为后续研究提供了关键信息。
  4. 与临床药物的对照：设置了以临床常用药柳氮磺吡啶（SASP）作为阳性对照，使得BP的治疗效果有一个直观且可靠的参照，增强了研究结果的临床相关性。

七、 其他有价值的内容

研究在讨论部分也客观指出了自身的局限性：目前的工作主要集中于整体动物水平的药效评价，尚未深入探讨BP发挥治疗作用的具体分子机制和靶点。作者提出了未来可能的研究方向，例如结合微生物组学、转录组学等技术，系统研究BP对肠道菌群、肠道屏障功能以及关键炎症信号通路（如NF-κB、MAPK等）的调控作用，以全面阐明其药效物质基础和作用机理。这种对研究局限性的认识和对未来工作的展望，体现了研究的严谨性和深度。此外，论文声明在写作过程中使用了AI工具进行语言润色，但所有内容均经作者严格审查和负责，符合当前学术规范。