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Oct-3/4在胚胎干细胞自我更新和分化中的作用

期刊:Nucleic Acids Res.

这篇文档属于类型c(产品技术文档),以下是其核心内容的结构化总结:


1. 产品基本信息

  • 产品名称:Oct-34 (C-10)抗体(货号sc-5279)
  • 生产商:Santa Cruz Biotechnology, Inc.
  • 靶标蛋白:Oct-3/4(又称POU5F1),一种调控胚胎干细胞(ES细胞)自我更新与分化的转录因子。
  • 物种特异性:可检测小鼠、大鼠和人类来源的Oct-3/4蛋白。

2. 生物学背景

  • 功能
    • Oct-3/4通过激活UTF1基因促进胚胎干细胞的快速增殖和致瘤性。
    • 人类中存在两种Oct-3/4亚型(Oct-3/4A和Oct-3/4B),维持干细胞的未分化表型。
    • 假基因定位于人类染色体10和8,在部分癌细胞系和组织中转录。
  • 染色体定位
    • 人类POU5F1基因位于6p21.33,小鼠位于17 B1。

3. 抗体技术参数

  • 抗体类型:小鼠单克隆抗体(IgG2b κ轻链),针对人类Oct-3/4的1-134氨基酸序列。
  • 产品形式
    • 基础形式:200 µg/1 mL PBS溶液(含<0.1%叠氮化钠和0.1%明胶)。
    • 偶联形式:
    • 琼脂糖(IP用)、HRP(WB/IHC/ELISA)、荧光标记(FITC/Alexa Fluor系列,用于WB/IF/FCM等)、生物素(WB/IHC/ELISA)。
  • 分子量
    • Oct-3/4A亚型:52 kDa;Oct-3/4B亚型:45 kDa(本抗体不与B亚型交叉反应)。

4. 应用场景与实验条件

  • 推荐应用
    • Western Blot(WB):起始稀释1:200,范围1:100-1:1000。
    • 免疫沉淀(IP):1-2 µg抗体/100-500 µg总蛋白。
    • 免疫荧光(IF):起始稀释1:50,范围1:50-1:500。
    • 免疫组化(IHC):适用于石蜡包埋组织,稀释条件同IF。
    • 流式细胞术(FCM):1 µg抗体/1×10^6细胞。
    • ELISA:起始稀释1:30,范围1:30-1:3000。
  • 阳性对照:F9细胞裂解液(sc-2245)、NTera-2 cl.D1全细胞裂解液(sc-364181)等。

5. 质量控制与存储

  • 存储条件:4°C保存(禁止冷冻),有效期1年。
  • 安全性:非危险品,无需MSDS(化学品安全说明书)。

6. 研究用途与限制

  • 用途声明:仅限科研使用,不可用于诊断。
  • 相关产品
    • Oct-34 siRNA/shRNA质粒及慢病毒颗粒(如sc-36123-sh、sc-36124-v等)。

7. 文献引用示例

  • 关键参考文献
    1. Nichols et al. (1998) *Cell*:证实Oct-4是哺乳动物胚胎多能干细胞形成的关键因子。
    2. Takeda et al. (1992) *Nucleic Acids Res*:解析人类Oct3基因家族的剪接变体和表达特征。

8. 数据展示

  • WB结果示例:在F9、ES-D3和NTera-2 cl.D1细胞裂解液中检测到约51 kDa的Oct-3/4条带。
  • 免疫荧光示例:小鼠胚胎细胞核定位(斯坦福大学Dr. Kira Foygel提供)。

总结

本文档是Santa Cruz Biotechnology公司针对Oct-3/4抗体的技术说明书,详细描述了其生物学功能、产品特性、实验应用及质量控制信息,为干细胞和癌症研究领域提供重要工具。

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