这篇文档属于类型c(产品技术文档),以下是其核心内容的结构化总结:
1. 产品基本信息
- 产品名称:Oct-3⁄4 (C-10)抗体(货号sc-5279)
- 生产商:Santa Cruz Biotechnology, Inc.
- 靶标蛋白:Oct-3/4(又称POU5F1),一种调控胚胎干细胞(ES细胞)自我更新与分化的转录因子。
- 物种特异性:可检测小鼠、大鼠和人类来源的Oct-3/4蛋白。
2. 生物学背景
- 功能:
- Oct-3/4通过激活UTF1基因促进胚胎干细胞的快速增殖和致瘤性。
- 人类中存在两种Oct-3/4亚型(Oct-3/4A和Oct-3/4B),维持干细胞的未分化表型。
- 假基因定位于人类染色体10和8,在部分癌细胞系和组织中转录。
- 染色体定位:
- 人类POU5F1基因位于6p21.33,小鼠位于17 B1。
3. 抗体技术参数
- 抗体类型:小鼠单克隆抗体(IgG2b κ轻链),针对人类Oct-3/4的1-134氨基酸序列。
- 产品形式:
- 基础形式:200 µg/1 mL PBS溶液(含<0.1%叠氮化钠和0.1%明胶)。
- 偶联形式:
- 琼脂糖(IP用)、HRP(WB/IHC/ELISA)、荧光标记(FITC/Alexa Fluor系列,用于WB/IF/FCM等)、生物素(WB/IHC/ELISA)。
- 分子量:
- Oct-3/4A亚型:52 kDa;Oct-3/4B亚型:45 kDa(本抗体不与B亚型交叉反应)。
4. 应用场景与实验条件
- 推荐应用:
- Western Blot(WB):起始稀释1:200,范围1:100-1:1000。
- 免疫沉淀(IP):1-2 µg抗体/100-500 µg总蛋白。
- 免疫荧光(IF):起始稀释1:50,范围1:50-1:500。
- 免疫组化(IHC):适用于石蜡包埋组织,稀释条件同IF。
- 流式细胞术(FCM):1 µg抗体/1×10^6细胞。
- ELISA:起始稀释1:30,范围1:30-1:3000。
- 阳性对照:F9细胞裂解液(sc-2245)、NTera-2 cl.D1全细胞裂解液(sc-364181)等。
5. 质量控制与存储
- 存储条件:4°C保存(禁止冷冻),有效期1年。
- 安全性:非危险品,无需MSDS(化学品安全说明书)。
6. 研究用途与限制
- 用途声明:仅限科研使用,不可用于诊断。
- 相关产品:
- Oct-3⁄4 siRNA/shRNA质粒及慢病毒颗粒(如sc-36123-sh、sc-36124-v等)。
7. 文献引用示例
- 关键参考文献:
- Nichols et al. (1998) *Cell*:证实Oct-4是哺乳动物胚胎多能干细胞形成的关键因子。
- Takeda et al. (1992) *Nucleic Acids Res*:解析人类Oct3基因家族的剪接变体和表达特征。
8. 数据展示
- WB结果示例:在F9、ES-D3和NTera-2 cl.D1细胞裂解液中检测到约51 kDa的Oct-3/4条带。
- 免疫荧光示例:小鼠胚胎细胞核定位(斯坦福大学Dr. Kira Foygel提供)。
总结
本文档是Santa Cruz Biotechnology公司针对Oct-3/4抗体的技术说明书,详细描述了其生物学功能、产品特性、实验应用及质量控制信息,为干细胞和癌症研究领域提供重要工具。