这篇文档属于类型a，即报告了一项原创性研究的科学论文。以下是对该研究的学术报告：

作者及机构
本研究由Eric Tran、Paul F. Robbins、Yong-Chen Lu等来自美国国立卫生研究院（National Institutes of Health）下属国家癌症研究所（National Cancer Institute）外科分支（Surgery Branch）的研究团队完成，通讯作者为Steven A. Rosenberg。研究发表于*The New England Journal of Medicine*（NEJM）2016年12月8日第375卷第23期。

学术背景
研究领域为肿瘤免疫治疗，聚焦于KRAS突变驱动的癌症。KRAS是胃肠道癌症中常见的驱动突变基因，其中KRAS G12D（第12位甘氨酸突变为天冬氨酸）在胰腺癌（45%）和结直肠癌（13%）中高发，但长期以来缺乏有效靶向药物。研究团队此前发现，肿瘤浸润淋巴细胞（Tumor-Infiltrating Lymphocytes, TILs）可通过识别肿瘤新抗原（neoepitopes）介导肿瘤消退，但针对驱动突变（如KRAS G12D）的T细胞免疫应答尚未明确。本研究旨在探索：
1. KRAS G12D是否可被TILs特异性识别；
2. 过继性T细胞转移（Adoptive Cell Therapy, ACT）能否诱导临床响应；
3. 肿瘤免疫逃逸的潜在机制。

研究流程与方法
1. 患者与样本
- 研究对象：一名50岁转移性结直肠癌女性患者（编号4095），基线CT显示7处肺转移灶。
- 样本处理：通过胸腔镜手术切除3处病灶（直径0.6-1.0 cm），分离24个TILs培养株，并进行全外显子测序（中位深度128-163×）和转录组测序（数据编号PRJNA342632）。

1. TILs筛选与扩增

   • 新抗原筛选：通过突变肽段库刺激TILs，结合细胞内细胞因子染色（IFN-γ、TNF、IL-2）和CD107a脱颗粒实验，鉴定出特异性识别KRAS G12D的CD8+ T细胞克隆（占比49.5%-0.04%）。
     
   • 治疗准备：选择反应性最高的TILs培养株（6号培养物），经快速扩增程序（Rapid-Expansion Protocol, REP）获得1.48×10^11个TILs（含75% KRAS G12D特异性CD8+ T细胞）。
     

2. 临床治疗与监测

   • 治疗方案：患者接受非清髓性淋巴细胞清除化疗（环磷酰胺+氟达拉滨）后，输注TILs并辅以5剂IL-2。
     
   • 疗效评估：通过CT扫描监测病灶变化，40天后所有7处转移灶消退，9个月后1处病灶（病灶3）进展。
     

3. 免疫逃逸机制分析

   • 基因组分析：对进展病灶进行全外显子测序，发现KRAS G12D突变仍存在，但染色体6q21区域（编码HLA-C*08:02）发生拷贝中性杂合性缺失（Copy-Neutral Loss of Heterozygosity），导致T细胞无法识别肿瘤。
     

4. T细胞受体（TCR）特性研究

   • 克隆追踪：通过深度测序TCRβ可变区，发现输注的4个KRAS G12D反应性克隆中，TRBV10-02克隆在体内持续存在（占外周血T细胞的10.4%）。
     
   • 特异性验证：将TCR转导至自体T细胞，证实其仅识别HLA-C*08:02限制的KRAS G12D肽段（9mer/10mer），且不识别野生型KRAS（EC50=1-10 nM）。
     

主要结果
1. 临床响应：TILs输注后，所有肺转移灶显著缩小（部分完全消退），持续9个月的无进展生存期。
2. 免疫逃逸：进展病灶通过丢失HLA-C*08:02等位基因逃避免疫攻击，证实HLA-I类分子缺失是ACT耐药的关键机制。
3. TCR共享性：从另一名患者（3995）分离的KRAS G12D反应性TCR与本研究中的两个克隆具有相同α链CDR3序列，提示“公共T细胞应答”可能普遍存在。

结论与价值
1. 科学意义：首次证明KRAS驱动突变可被内源性T细胞识别，并可通过ACT实现临床缓解，为靶向KRAS的免疫治疗提供直接证据。
2. 应用前景：HLA-C*08:02限制性TCR可用于开发通用型T细胞疗法，适用于约8%-11%的欧美人群及KRAS G12D高发的胰腺癌/结直肠癌患者。
3. 临床启示：肿瘤通过HLA丢失逃逸免疫监视，提示联合靶向多HLA限制性抗原或CD4+ T细胞策略的必要性。

研究亮点
1. 创新性发现：首次报道KRAS G12D特异性TILs介导的肿瘤消退及HLA丢失导致的免疫逃逸。
2. 方法学突破：结合深度测序、TCR克隆追踪和功能性验证，建立了从新抗原鉴定到临床转化的完整流程。
3. 转化意义：为KRAS突变肿瘤的个性化免疫治疗提供了可推广的方案设计。

其他价值
研究数据（如TCR序列、突变谱）已公开，可供后续研究参考。此外，团队正在扩展针对其他KRAS突变（如G12V）的TCR筛选，以覆盖更广泛人群。

（注：全文约1500字，涵盖研究全貌及关键细节）