这篇研究论文由Jia Zhou、Sanzhong Li和Zhenguo Zeng等人合作完成，研究团队来自南昌大学江西医学院第一附属医院重症医学科、输血科以及江西省重症医学重点实验室。论文于2025年发表在《Journal of Ethnopharmacology》期刊上，标题为”Dendrobine alleviates LPS-induced acute lung injury via activation of the PI3K/Akt/GSK3β pathway”。
学术背景 脓毒症（sepsis）是一种由感染引发的全身性炎症反应综合征，常伴随多器官功能障碍，其中急性肺损伤（acute lung injury, ALI）是其常见且严重的并发症。目前临床治疗主要依赖支持性护理和抗生素，但死亡率仍居高不下。石斛碱（dendrobine）是从传统中药金钗石斛（Dendrobium nobile Lindl）中提取的生物碱，既往研究证实其具有抗炎和抗氧化特性，但其在脓毒症相关ALI中的作用机制尚未明确。本研究旨在探究石斛碱通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路缓解脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤的分子机制。
研究流程 1. 体内实验设计
采用C57/BL雄性小鼠建立LPS诱导的脓毒症ALI模型（n=5-6/组）。实验分为四组：对照组、LPS模型组、地塞米松阳性对照组（5 mg/kg）以及石斛碱干预组（10/40/60 mg/kg）。通过灌胃预处理5天后，腹腔注射LPS（10 mg/kg）造模6小时。检测指标包括：
- 肺组织病理学（H&E染色、F4/80免疫组化评估巨噬细胞浸润）
- 细胞凋亡（TUNEL染色）
- 支气管肺泡灌洗液（BALF）中炎症因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）的ELISA检测
- 氧化应激指标（MDA、SOD、GSH）
- PI3K/Akt/GSK3β通路蛋白的Western blot分析
体外细胞实验
使用THP-1人单核细胞系，通过PMA诱导分化为巨噬细胞。实验分组包括：对照组、LPS刺激组（100 ng/ml）、石斛碱预处理组（5/10/20 μM）及PI3K抑制剂LY294002干预组。检测内容包括：
网络药理学与分子对接
通过SwissTargets、PharmMapper等数据库筛选石斛碱与脓毒症的共有靶点，构建蛋白质相互作用（PPI）网络。关键靶点通过KEGG通路富集分析锁定PI3K/Akt通路。采用AutoDock软件进行分子对接，结合能分析显示石斛碱与PI3K（-7.4 kcal/mol）、Akt（-7.3 kcal/mol）和GSK3β（-5.2 kcal/mol）具有稳定结合。
机制验证
通过PI3K抑制剂LY294002反向验证：在体内外实验中，LY294002均能抵消石斛碱对炎症因子分泌、氧化应激及PI3K/Akt/GSK3β磷酸化的调控作用，证实该通路的核心地位。
主要结果
1. 石斛碱减轻肺组织损伤
- 病理评分显示，40 mg/kg石斛碱组肺泡结构破坏、炎性浸润较LPS组显著改善（p<0.01），效果与地塞米松相当。
- BALF中蛋白浓度和细胞计数分别降低42.7%和38.9%（p<0.001），提示血管通透性改善。
抗炎与抗氧化作用
通路激活证据
Western blot显示石斛碱显著提升p-PI3K、p-Akt和p-GSK3β表达（体外：1.8-2.2倍；体内：1.5-1.9倍），而LY294002可完全阻断此效应。
结论与价值
本研究首次揭示石斛碱通过激活PI3K/Akt/GSK3β通路，抑制巨噬细胞过度活化和炎症因子释放，从而缓解脓毒症相关ALI。其科学价值在于：
1. 阐明了传统中药成分石斛碱的现代药理学机制，为”中药现代化”研究提供范例。
2. 提出PI3K/Akt/GSK3β通路作为脓毒症治疗的新靶点，为开发抗炎药物提供理论依据。
研究亮点
1. 多维度验证：结合网络药理学预测、分子对接与实验验证，形成完整证据链。
2. 转化医学意义：40 mg/kg石斛碱的疗效与地塞米松相当，但潜在副作用更低（60 mg/kg组出现肝毒性提示需优化剂量）。
3. 技术创新：采用CETSA（cellular thermal shift assay）直接证明石斛碱与靶蛋白的结合，增强机制可信度。
局限性
作者指出：未探索其他潜在通路（如NF-κB）、缺乏临床数据、建议未来采用CRISPR/Cas9基因编辑进一步验证。这些为后续研究指明方向。