分享自:

基于LC–ESI–MS/MS同时定量黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和M1的发酵大豆制品安全性评价

期刊:Biomedical ChromatographyDOI:10.1002/bmc.4541

这篇文档属于类型a,即报告了一项原创性研究。以下是针对该研究的学术报告:


作者与机构
本研究由Feng Qiu、Henan Shi、Siqi Wang、Li Ma和Manyuan Wang共同完成,所有作者均来自首都医科大学中医药学院中医络病理论研究北京市重点实验室。研究论文发表于《Biomedical Chromatography》期刊,2019年出版,DOI编号为10.1002/bmc.4541。

学术背景
研究领域为中药安全性与真菌毒素检测。淡豆豉(Semen Sojae Preparatum, SSP)是一种广泛应用于中医药和功能性食品的发酵大豆制品,但其发酵过程中可能被黄曲霉毒素(aflatoxins, AFTs)污染。黄曲霉毒素是由黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillus parasiticus)产生的强毒性和强致癌性次级代谢产物,其中黄曲霉毒素B1(AFB1)的毒性最强,被世界卫生组织列为1类致癌物。目前,中国药典尚未对淡豆豉中的黄曲霉毒素设定限量标准,因此开发高灵敏度、高准确性的检测方法并评估其安全性具有重要意义。

研究流程
1. 样品准备与发酵工艺
- 收集了22批淡豆豉样品,包括13批市售商品和9批实验室自制样品。自制样品分为三组:
- 组1(S-14–16):按中国药典工艺发酵,添加青蒿(Artemisia annua L.)和桑叶(Morus alba L.)为辅料;
- 组2(S-17–19):仅添加青蒿;
- 组3(S-20–22):仅添加桑叶。
- 发酵过程中监测黄曲霉毒素的产生,以评估辅料对毒素的抑制作用。

  1. 分析方法开发

    • 采用液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)技术,建立了同时检测AFB1、AFB2、AFG1、AFG2和AFM1的方法。
    • 色谱条件:Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(2.1 × 50 mm, 3.5 μm),流动相为含0.1%甲酸的水和乙腈,梯度洗脱,流速0.50 mL/min,运行时间4.5分钟。
    • 质谱条件:正离子模式(ESI+),多反应监测(MRM),优化了碰撞能量(CE)和去簇电压(DP)等参数。
  2. 方法验证

    • 选择性:通过对比空白基质和标准溶液的色谱图,确认无干扰峰。
    • 线性与灵敏度:AFB1、AFG1和AFM1的线性范围为0.020–20.0 ng/mL,AFB2和AFG2为0.006–6.00 ng/mL;检出限(LOD)为0.002–0.007 ng/mL。
    • 精密度与准确度:日内和日间精密度RSD <14.3%,回收率为93.0%–107.0%。
  3. 样品检测与数据分析

    • 对22批样品进行黄曲霉毒素定量分析,采用层次聚类分析(HCA)评估样品间的安全性差异。

主要结果
1. 污染情况
- 81.8%的市售样品检出黄曲霉毒素,主要为AFB1、AFB2和AFG1,其中2批(S-04和S-13)超出欧盟限量标准(AFB1 μg/kg,总AFTs <10 μg/kg)。
- 实验室自制样品中,未添加青蒿或桑叶的组别(S-17–22)AFB1和AFB2污染严重,而按药典工艺发酵的组别(S-14–16)未检出毒素。

  1. 辅料作用

    • 青蒿和桑叶显著抑制产毒真菌的生长,降低黄曲霉毒素污染风险。
  2. 方法性能

    • LC-ESI-MS/MS法灵敏度高(LOD低至0.002 ng/mL)、分析速度快(4.5分钟/样品),适合大规模筛查。

结论与价值
1. 科学价值
- 首次系统评估了淡豆豉中黄曲霉毒素的污染风险,证实发酵工艺中辅料(青蒿和桑叶)的解毒作用。
- 开发的LC-ESI-MS/MS方法为中药和食品中多毒素同步检测提供了技术参考。

  1. 应用价值
    • 建议将AFB1和总AFTs作为淡豆豉的安全性指标,并纳入中国药典标准。
    • 研究结果为发酵类中药的质量控制提供了实践依据。

研究亮点
1. 创新方法:首次将LC-ESI-MS/MS用于淡豆豉中5种黄曲霉毒素的高通量检测。
2. 工艺优化:明确了青蒿和桑叶在抑制毒素生成中的关键作用。
3. 跨学科应用:结合微生物学、分析化学和统计学方法,全面评估中药安全性。

其他发现
层次聚类分析(HCA)显示,污染水平相似的样品可归为同一安全等级,为市场监管提供了分类依据。


(注:报告全文约1500字,涵盖研究背景、方法、结果与结论的完整逻辑链。)

上述解读依据用户上传的学术文献,如有不准确或可能侵权之处请联系本站站长:admin@fmread.com