这篇文档描述了由Youjun Zeng、Lei Wang、Shu-Yuen Wu等研究人员团队开发的一种基于声光可调滤波器(AOTF)和白光激光器的波长扫描表面等离子体共振(SPR)成像传感器系统。该研究发表在2017年的《Sensors》期刊上,旨在解决传统SPR成像技术在数据采集速度和检测灵敏度方面的不足,为实时、高通量、高分辨率的生物分子相互作用分析提供新工具。研究团队来自深圳大学、香港中文大学、深圳出入境检验检疫局和克莱姆森大学等多个机构。
表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)技术是一种实时、免标记的高灵敏度检测方法,广泛应用于生物分子相互作用动力学研究和化学/生物分析物检测。传统SPR成像技术存在数据采集速度慢和检测灵敏度有限的问题,难以完全替代荧光微阵列技术。本研究通过结合光谱调制法和二维(2D)微阵列技术,利用AOTF和白光激光器开发了一套快速SPR成像系统,显著提高了检测速度和灵敏度。
研究团队设计了一种快速波长扫描SPR成像系统,核心包括:
- 白光激光光源:提供高亮度、稳定性的宽谱激发光(600-700 nm)。
- AOTF:作为可调滤波器,实现快速波长扫描(响应时间1ms),带宽为2.5-5.0 nm(600-680 nm)。
- 反馈控制算法:通过动态调整扫描范围(±15 nm),仅聚焦于SPR共振峰附近的光谱区域,将单次测量时间缩短至0.35秒。算法通过实时跟踪共振波长变化,调整扫描区间,降低数据采集时间。
系统采用Kretschmann配置(棱镜耦合SPR结构),具体包括:
- 传感器芯片:BK7棱镜+48 nm金膜,手动优化入射角(纯水条件下72.5°)。
- CCD相机:帧率90 fps,采集反射光强度分布。
- 数据处理方法:基于30×20像素区域取平均以减少噪声,并采用数值比对算法实现SPR共振峰的自动定位。
(1)线性范围与灵敏度分析
通过测量不同浓度盐溶液(0%-25% NaCl,折射率1.3330-1.3793 RIU),验证系统的动态检测范围为4.63×10⁻² RIU。低浓度盐溶液(0.01%-0.05% NaCl)测试显示,系统灵敏度达1.27×10⁻⁶ RIU。
(2)生物分子相互作用监测
以兔IgG与山羊抗兔IgG的抗原-抗体结合为例:
- 芯片制备:兔IgG通过物理吸附固定在传感器表面,形成3×2阵列。
- 实时监测:注入10 µg/mL山羊抗兔IgG后,系统成功捕获结合过程的共振波长偏移(图5),证明其实时高通量检测能力。
该研究开发的AOTF-SPR成像系统具有以下创新点:
1. 快速扫描:通过AOTF和反馈算法实现毫秒级波长切换,大幅提升检测效率。
2. 无机械部件:全固态设计增强系统稳定性和可靠性。
3. 应用潜力:适用于药物筛选、疾病诊断和蛋白质组学等高通量分析场景。
研究团队指出,该系统可进一步结合微流控技术,实现更高效的样本处理与多参数分析。此外,AOTF的窄带宽特性有助于减少光谱干扰,提升信噪比。
(注:本文所有术语首次出现时均标注英文原词,如“表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)”)