本研究《狼疮肾炎患者疾病活动新型生物标志物的发现及验证》由南京大学医学院附属金陵医院（东部战区总医院）国家肾脏疾病临床医学研究中心的南迪*、刘晶晶*、王晓玉、高行健、郑春霞、刘志红团队完成，发表于2025年6月的《肾脏病与透析肾移植杂志》（Journal of Nephrology Dialysis & Transplantation）第34卷第3期。以下为详细学术报告：

一、研究团队与发表信息

通讯作者为刘志红教授（邮箱：liuzhihong@nju.edu.cn）和郑春霞教授（邮箱：springrosycloud@163.com），共同第一作者为南迪和刘晶晶。研究获国家自然科学基金重点项目（BK20243061）和国家重点研发计划（2024YFC251102）支持。

二、学术背景

科学领域：本研究属于自身免疫疾病与精准医学交叉领域，聚焦系统性红斑狼疮（SLE）的肾脏并发症——狼疮肾炎（Lupus Nephritis, LN）。
研究动机：LN是SLE患者死亡的主要危险因素，但现有非侵入性生物标志物（如补体C3/C4）特异性和灵敏度不足。肾活检虽为金标准，但具有创伤性且无法动态监测。
研究目标：通过高通量蛋白质组学技术筛选循环中反映LN疾病活动的新型生物标志物，为临床诊断和治疗监测提供新工具。

三、研究流程与方法

1. 研究对象与分组

• 筛选阶段：
  
  • 健康对照组（Con1）：n=10，年龄、性别匹配。
    
  • 活动性LN组（ALN1）：n=9，SLE疾病活动指数（SLEDAI）≥12。
    
  • 非活动性LN组（ILN1）：n=9，SLEDAI≤8。
    
• 验证阶段：
  
  • 扩大队列（ALN2/ILN2）：活动性LN n=50，非活动性LN n=49，健康对照n=49。
    
  • 前瞻性随访队列：缓解组（CR1/CR2）和不缓解组（NR1/NR2）各25例，采集基线及治疗后3/6月样本。

2. 技术方法

• Olink蛋白质组学：
  
  • 检测184种炎症/免疫分子（92种炎症分子+92种免疫分子），使用NPX值（Normalized Protein Expression）量化蛋白表达。
    
  • 优势：高灵敏度（可检测低至fg/mL的蛋白）、高通量（一次性检测多指标）、抗干扰性强。
    
• ELISA验证：
  
  • 对筛选出的关键分子（LIFR和BTN3A2）进行定量验证，采用商品化试剂盒（Origene和源桔生物科技）。
    

3. 数据分析

• 差异蛋白筛选：通过Olink Analyze包分析差异表达蛋白（DEPs），采用Benjamini-Hochberg法校正多重假设检验。
  
• 功能富集分析：使用ClusterProfiler进行KEGG通路富集，揭示差异蛋白涉及的信号通路（如NF-κB、TLR通路）。
  
• 诊断效能评估：ROC曲线分析评估标志物的AUC值，Pearson相关性分析分子与临床指标（如SLEDAI、补体水平）的关系。
  

四、主要研究结果

1. 差异分子筛选：

   • ALN1组 vs ILN1组：鉴定出25个差异分子，其中17个AUC>0.8（如LIFR、BTN3A2、MCP-4）。
     
   • KEGG通路：差异分子富集于NF-κB和TLR通路，与LN的炎症机制一致。
     

2. 前瞻性队列验证：

   • CR1组：11个分子（如LIFR、BTN3A2）在治疗缓解后显著下降（p<0.001），而NR1组无变化。
     
   • 动态关联：LIFR和BTN3A2水平与疾病活动同步变化，证实其作为动态监测指标的潜力。
     

3. ELISA验证：

   • 表达差异：ALN2组LIFR和BTN3A2浓度显著高于ILN2和健康组（p<0.01）。
     
   • 诊断效能：
     
     • LIFR的AUC=0.815（95%CI 0.725–0.904），BTN3A2的AUC=0.806（0.716–0.896）。
       
     • 联合诊断时AUC提升至0.900（0.829–0.970）。
       
   • 临床相关性：
     
     • LIFR与SLEDAI评分正相关（r=0.557），与补体C3负相关（r=-0.455）。
       
     • BTN3A2与SLEDAI（r=0.468）和补体C4（r=-0.435）均负相关。
       

五、结论与意义

1. 科学价值：
   
   • 首次发现循环LIFR（白血病抑制因子受体）和BTN3A2（嗜乳脂蛋白亚家族3成员A2）可作为LN疾病活动的特异性标志物。
     
   • 揭示了JAK/STAT（通过LIFR）和γδ T细胞激活（通过BTN3A2）在LN中的潜在作用机制。
     
2. 应用价值：
   
   • 为非侵入性监测LN活动性提供新工具，有望替代部分肾活检需求。
     
   • 为靶向治疗（如JAK抑制剂）提供潜在分子靶点。
     

六、研究亮点

1. 方法创新：
   
   • 整合Olink蛋白质组学（高灵敏度）与多阶段临床队列验证，提升结果可靠性。
     
2. 发现新颖性：
   
   • LIFR和BTN3A2为SLE/LN中未报道的新标志物，扩大了对疾病机制的认识。
     
3. 临床转化潜力：
   
   • 标志物动态变化与治疗反应高度一致，适合个体化疗效评估。
     

七、局限性与展望

1. 局限性：
   
   • 样本量较小（尤其是筛选阶段），且未涵盖更长随访时间。
     
   • Olink检测限于预设蛋白 panel，可能遗漏其他关键分子。
     
2. 未来方向：
   
   • 扩大队列验证标志物在不同病理分型中的特异性。
     
   • 探索LIFR/BTN3A2在LN发病中的分子机制及干预策略。
     

（字数：约1800字）