本研究由西北农林科技大学食品科学与工程学院Yongjia Yang、Shuwei Nian、Bihe Zhu等作者与杨凌和盛辐照技术有限公司Jiangtao Yu、Junqing Bai合作完成,成果发表于《Food Chemistry》期刊2025年第464卷(文章编号141595)。研究聚焦X射线辐照技术在香菇低温贮藏期间风味物质保留的作用机制,属于食品保鲜与辐照技术交叉领域的原创性研究。
学术背景
香菇(Lentinula edodes)因其独特风味和高营养价值广受青睐,但采后贮藏过程中易因微生物生长和代谢活动导致风味物质流失。传统低温贮藏虽能延缓腐败,却无法有效抑制香气成分降解。已有研究表明,辐照技术(如γ射线、电子束)可通过调控酶活性和代谢途径影响食用菌风味,但X射线处理对香菇风味物质保留的具体机制尚未明晰。本研究旨在阐明0.5 kGy X射线处理通过调控脂肪酸代谢、含硫氨基酸代谢及香菇酸代谢途径延缓香菇风味劣变的分子机制,为辐照技术在食用菌采后保鲜中的应用提供理论依据。
研究流程与方法
1. 样品制备与辐照处理
- 样品来源:从陕西杨凌市场采购10 kg新鲜香菇(直径60-65 mm),每8个为一组置于商用塑料托盘,以0.04 mm聚乙烯薄膜包装。
- 辐照设计:对照组(未辐照)与0.5 kGy X射线处理组(采用DD5MeV-30 mA/1200型电子加速器产生X射线,Ag₂Cr₂O₇剂量计校准实际吸收剂量)。
- 贮藏条件:2±1°C、80±5%相对湿度下贮藏35天,每7天取样32个香菇进行分析。
2. 挥发性物质分析
- 方法:采用顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用(HS-SPME-GC-MS),以2-甲基-3-庚酮为内标,PDMS/DVB/CAR纤维头吸附20分钟,GC-MS-QP2010 Ultra分析。
- 创新点:通过保留指数(RI)与NIST 14.0质谱库双重比对鉴定化合物,半定量分析采用内标峰面积比值法。
3. 脂肪酸代谢相关分析
- 亚油酸含量测定:氯仿-甲醇(2:1)超声提取,硫酸-甲醇酯化后GC-8860气相色谱分析(CD-Wax色谱柱,程序升温)。
- 关键酶活性检测:
- 脂氧合酶(LOX):以亚油酸钠为底物,234 nm波长下监测吸光度变化(单位:U/g)。
- 醇脱氢酶(ADH):以乙醛和NADH为底物,340 nm波长测定吸光度变化。
- 脂质氢过氧化物:二甲苯胺比色法测定350 nm吸光度。
4. 含硫氨基酸代谢研究
- 甲硫氨酸与半胱氨酸含量:6 M HCl水解后,异硫氰酸苯酯衍生化,HPLC(Venusil AA柱)分析。
- 关键酶活性:
- γ-谷氨酰转肽酶(GGT):试剂盒法测定415 nm下对硝基苯胺释放速率。
- 胱氨酸亚砜裂解酶(C-S Lyase):以S-甲基-L-半胱氨酸亚砜为底物,520 nm测定丙酮酸生成量。
- 丙酮酸含量:2,4-二硝基苯肼显色法测定520 nm吸光度。
5. 数据统计
所有实验重复3次,SPSS 22.0进行Duncan多重检验(p<0.05为显著差异),结果以均值±标准差表示。
主要结果
- 挥发性物质保留:0.5 kGy X射线处理显著提升1-辛烯-3-醇(1-octen-3-ol)、3-辛醇等关键风味物质含量(第0天1-辛烯-3-醇达对照组1.63倍),贮藏末期总挥发性物质仍高于对照组(p<0.05)。
- 脂肪酸代谢调控:
- 亚油酸含量在贮藏第14天达峰值(对照组0.22 mg/g vs 辐照组0.19 mg/g),随后辐照组降解速率较对照组降低23%。
- LOX与ADH活性在0-14天显著增强(辐照组LOX活性第7天较对照组高32%),促进亚油酸氧化为醛酮类风味前体。
- 含硫化合物合成:
- 辐照组甲硫氨酸和半胱氨酸降解速率分别较对照组快28%和11%,伴随GGT和C-S Lyase活性升高(第14天GGT活性辐照组31.36 U/g vs 对照组25.77 U/g)。
- 相关性分析显示半胱氨酸与香菇硫醚(lenthionine)含量呈强正相关(r=0.83)。
结论与价值
研究证实0.5 kGy X射线通过三重机制延缓香菇风味劣变:
1. 脂肪酸代谢激活:促进LOX/ADH介导的亚油酸氧化,增强八碳化合物(如1-辛烯-3-醇)合成。
2. 含硫氨基酸代谢加速:通过GGT/C-S Lyase通路促进香菇酸转化为硫醚类风味物质(如二甲基二硫醚)。
3. 能量代谢调控:抑制丙酮酸积累,延缓呼吸代谢导致的香气损耗。
科学价值:首次系统揭示X射线辐照对香菇风味物质保留的分子机制,填补了辐照技术与风味化学交叉领域的空白。
应用价值:为食用菌采后低剂量X射线保鲜工艺的标准化提供理论支撑,可拓展至其他高值易腐农产品的贮藏实践。
研究亮点
- 方法创新:整合HS-SPME-GC-MS与酶活动力学分析,建立辐照-风味代谢网络关联模型。
- 机制突破:发现X射线对香菇酸代谢途径的特异性激活作用,为硫化物调控提供新靶点。
- 剂量优化:明确0.5 kGy为兼顾风味保留与食品安全的最佳剂量,避免高剂量辐照异味产生。
其他发现
- 辐照诱导的脂质氢过氧化物积累(贮藏末期辐照组较对照组高47%)可能通过调控氧化还原状态间接影响风味稳定性。
- 研究团队开发的Ag₂Cr₂O₇剂量校准体系为低能X射线食品处理提供了精准剂量监控方案。