《Journal of Chromatography B》发表关于右美托咪定在母乳中检测方法及其在剖宫产后哺乳安全性研究的重要成果

作者及机构
本研究由日本冈山大学医学、牙科与药物科学研究生院（Okayama University）的Ika Nakanishi、Manabu Yoshimura（共同第一作者）、Manabu Suno（通讯作者）团队主导，联合日本社区医疗组织德山中央医院（Japan Community Healthcare Organization Tokuyama Central Hospital）麻醉科及旭川医科大学（Asahikawa Medical University）麻醉与重症医学科共同完成，研究成果于2017年发表在Journal of Chromatography B（卷1040，页码208–213）。

学术背景
右美托咪定（Dexmedetomidine, Dex）是一种高选择性α2-肾上腺素能受体激动剂，广泛用于重症监护和手术镇静。尽管其血浆药代动力学已有研究，但关于其在母乳中的排泄数据缺失，而剖宫产术后母乳喂养的安全性评估亟需此类数据。现有药物说明书仅基于大鼠实验提示“哺乳期慎用”，缺乏人类临床依据。因此，本研究旨在开发一种高灵敏度、高特异性的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）方法，定量检测母乳中的Dex浓度，并首次通过临床样本评估其哺乳期安全性。

研究流程与方法

1. 方法开发与验证

   • 样本处理：采用单步液液萃取（Liquid-Liquid Extraction, LLE）技术，以乙醚为萃取剂，从200 μL母乳中提取Dex及内标厄洛替尼（Erlotinib）。
     
   • 色谱条件：TSK-GEL ODS-100V色谱柱（5 μm, 2.0×100 mm），流动相为5 mM甲酸铵:0.1%甲酸乙腈（60:40, v/v），流速0.3 mL/min，等度洗脱。
     
   • 质谱检测：API4000质谱仪，正离子电喷雾电离（ESI+），多反应监测（MRM）模式，Dex和内标的质荷比（m/z）分别为201.221→95.100和394.100→278.000。
     
   • 方法验证：依据FDA指南，验证线性范围（10–2000 pg/mL）、灵敏度（LLOQ为10 pg/mL）、准确度（±5.8%）、精密度（CV<6.31%）、回收率（82.4–87.9%）及基质效应（98.8–102.5%）。
     

2. 临床样本分析

   • 研究对象：4名剖宫产术后患者，静脉输注Dex（初始6 μg/kg/h，维持0.2–0.7 μg/kg/h至手术结束）。
     
   • 样本采集：术后0 h（停药即刻）、6 h和24 h同步采集血浆及母乳样本。
     
   • 安全性评估指标：
     
     • 乳汁/血浆浓度比（M/P Ratio）：计算Dex在母乳与血浆中的浓度比值。
       
     • 相对婴儿剂量（Relative Infant Dose, RID）：通过婴儿每公斤体重摄入量（假设30 mL/kg/次）与母亲剂量比值评估风险。
       

主要结果

1. 方法学性能

   • 线性关系良好（R²=0.999），日内与日间精密度CV均<6.31%，回收率稳定（82.4–87.9%），基质效应可控（CV<8.02%）。
     
   • Dex在母乳中稳定性验证显示，经历三次冻融循环或室温放置4小时后浓度偏差%。
     

2. 临床数据

   • Dex检出情况：3名受试者的母乳样本在停药6 h后检出Dex（12.7–30.4 pg/mL），24 h后均未检出（低于LLOQ）。
     
   • M/P比值：0.76–0.88，表明Dex可被动扩散进入母乳，但浓度显著低于血浆。
     
   • RID值：0.040–0.098%，远低于Bennett提出的10%安全阈值。
     

结论与意义
本研究首次建立了一种高效、可靠的HPLC-MS/MS方法，填补了Dex在母乳中定量检测的技术空白。临床数据表明，Dex在停药24小时后完全从母乳中清除，且RID值极低（<0.1%），提示剖宫产术后24小时恢复哺乳具有安全性。这一结论为临床用药指南提供了直接证据，修正了仅基于动物实验的保守建议，具有重要的临床应用价值。

研究亮点
1. 技术创新：单步LLE结合HPLC-MS/MS显著简化前处理流程，灵敏度达pg级，优于既往SPE方法。
2. 临床转化价值：明确Dex在人类母乳中的排泄动力学，为哺乳期用药决策提供数据支持。
3. 方法普适性：验证流程严格遵循FDA标准，可推广至其他低浓度药物的母乳检测。

其他价值
研究团队同步验证了血浆中Dex的检测方法（补充数据），为后续药代动力学研究奠定基础。此外，M/P比值与大鼠实验数据的对比揭示了种属差异，提示动物模型外推至人类的局限性。