本研究由Sang Joon Park、Jae Young Jang（通讯作者）等来自韩国Soonchunhyang大学医学院消化疾病中心的多位研究者合作完成，发表于2017年的《Medicine》期刊（96卷11期，文章编号e5811）。研究聚焦肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）的诊断标志物，系统评估了甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein, AFP）、AFP-L3（Lens culinaris-agglutinin-reactive fraction of AFP）及维生素K缺乏或拮抗剂诱导蛋白II（Protein Induced by Vitamin K Absence or Antagonist-II, PIVKA-II）单独及联合使用的诊断效能。

学术背景

肝细胞癌是全球癌症相关死亡的第三大原因，在亚洲地区尤为高发，其主要风险因素为乙型肝炎病毒（HBV）感染。目前HCC的诊断依赖影像学检查和AFP等肿瘤标志物，但AFP在早期HCC中的敏感性不足（约40%阴性率）。既往研究表明，PIVKA-II和AFP-L3可能弥补AFP的局限性，但三者联合诊断的价值尚未明确。本研究旨在通过直接比较这些标志物及其组合的效能，为临床提供最优诊断策略。

研究流程与实验设计

1. 研究对象

   • 病例组：纳入79例新诊断HCC患者（根据韩国肝癌研究组指南确诊），排除既往恶性肿瘤史或AFP非肝病性升高等干扰因素。
     
   • 对照组：77例肝硬化（Liver Cirrhosis, LC）患者（经组织学或门脉高压临床特征确诊），均通过影像学排除HCC。
     
   • 分层分析：按巴塞罗那临床肝癌分期（BCLC）对HCC患者进一步分组（0期16例，A期40例）。

2. 标志物检测

   • 方法：采用微芯片毛细管电泳和液相结合法（MTAS Wako i30自动分析仪）同步检测血清AFP、AFP-L3和PIVKA-II水平。
     
   • 阈值设定：AFP>10 ng/mL、PIVKA-II>40 mAU/mL、AFP-L3>10%为阳性标准；另调整AFP阈值至20 ng/mL和AFP-L3至7%以验证结果稳健性。
     

3. 统计分析

   • 效能评估：通过受试者工作特征曲线（ROC）分析各标志物及组合的曲线下面积（AUC）、敏感性、特异性及准确性。
     
   • 组合定义：
     
     • “或”组合（任一标志物阳性）用于提高敏感性。
       
     • “与”组合（所有标志物阳性）用于提高特异性。
       
   • 相关性分析：计算AFP、AFP-L3与PIVKA-II的Spearman相关系数。

主要结果

1. 单标志物效能

   • AFP表现最佳（AUC=0.751，敏感性68.35%，特异性81.82%），显著优于AFP-L3（AUC=0.669，p=0.005）。
     
   • PIVKA-II的敏感性（70.89%）与AFP相近，但特异性较低（70.13%）。
     

2. 联合诊断效能

   • 最佳组合：”PIVKA-II>40 mAU/mL 且 AFP>10 ng/mL”（AUC=0.765，特异性97.40%，敏感性55.70%）。
     
   • AFP-L3的局限性：加入AFP-L3未显著提升诊断效能（如三联组合AUC降至0.696，p=0.001）。
     

3. 阈值调整验证

   • 将AFP阈值提高至20 ng/mL后，其单用AUC升至0.771，而”PIVKA-II+AFP”组合仍保持最高AUC（0.753）。
     
   • AFP-L3阈值降至7%时，其敏感性仅从50.63%提升至59.49%，但诊断贡献仍有限。
     

4. 标志物相关性

   • AFP与AFP-L3高度相关（r=0.735，p<0.001），而二者与PIVKA-II相关性中等（r=0.422–0.432）。
     

结论与价值

1. 临床意义

   • AFP作为单标志物仍是HCC诊断的最优选择，联合PIVKA-II可进一步提升特异性（>97%），适用于高风险人群筛查。
     
   • AFP-L3在当前阈值下对HCC鉴别诊断的贡献有限，可能需探索更优化的临界值或其他应用场景。
     

2. 科学价值

   • 首次系统比较了三类标志物在区分HCC与非HCC肝硬化中的效能，为亚洲人群（尤其是HBV相关肝病）提供了循证依据。
     
   • 通过多阈值验证和组合分析，明确了”AFP+PIVKA-II”的临床适用性，为简化诊断流程提供支持。
     

研究亮点

1. 方法学创新：采用自动化分析平台同步检测三类标志物，减少批次误差；通过”与/或”组合定义优化诊断策略。
   
2. 临床实用性：针对不同分期HCC（如早期BCLC 0/A期）分析标志物效能，证实AFP在早期诊断中的稳定性。
   
3. 局限性：回顾性单中心设计及病例组/对照组病因差异（HCC以HBV为主，LC以酒精为主）可能影响结果泛化性，需前瞻性多中心研究验证。
   

其他发现

• 病因影响：HBV相关HCC更易出现AFP升高，可能与病毒致癌机制相关，提示标志物选择需考虑基础肝病类型。
  
• 分期差异：在BCLC 0/A期患者中，”PIVKA-II或AFP”组合敏感性达68.75–87.50%，支持其用于早期筛查。
  

该研究为HCC血清学诊断提供了重要循证证据，并提出了以AFP为核心、选择性联合PIVKA-II的优化方案，对临床实践具有直接指导意义。