使用长范围PCR和纳米孔测序检测基因编辑后变化的稳健工作流程

Grepore-seq:一种通过长范围PCR和纳米孔测序检测基因编辑后变化的稳健工作流程 研究背景 CRISPR/Cas9系统作为一种RNA指导的DNA内切酶系统,在基因组编辑中得到了广泛的应用。随着其在临床治疗中潜力的不断增加,全面评估基因编辑结果变得尤为重要。然而,目前缺乏一种大规模、经济高效且具有流水线性质的方法来检测基因编辑的结果,特别是插入或缺失大片段的情况。研究表明,CRISPR/Cas9编辑后可能出现非目标效果,如大片段删除和复杂的基因组重排,这对其临床应用提出了挑战。 研究目的和创新 为了解决上述问题,本研究引入了一种新型处理流程“grepore-seq”,其结合了长范围PCR和纳米孔测序,以高效且准确地检测CRISPR/Cas9编辑后的多种基因变化。由于Oxford Nan...

在基因组编辑中,sacas9比spcas9具有优越的保真度和不同的编辑结果

高保真度和不同基因编辑结果的SaCas9与SpCas9比较 研究背景 基于Cas9蛋白的CRISPR系统已经成为基因组编辑的强大工具,并在基础研究和临床基因治疗中得到广泛应用。当前,最常用的Cas9变体是来自化脓链球菌(Streptococcus pyogenes)的SpCas9和来自金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的SaCas9。尽管这两种Cas9蛋白在许多研究中得到了广泛验证,但具体的基因编辑效果比较仍然缺乏系统性研究。因此本文旨在系统比较SpCas9和SaCas9在基因编辑中的效率和精确度,并探讨其在不同剪切长度下的编辑性能。 研究来源 本文由来自中国医学科学院血液学研究所等几个研究机构的研究者们撰写,包括Zhi-Xue Yang、Ya-Wen Fu、Jia...

人类胎儿肝终末红细胞生成的全面表征和全球转录组分析

人类胎儿肝终末红细胞生成综合特征及全转录组分析 背景和问题 红细胞生成(Erythropoiesis)是红细胞生产的过程。起初在卵黄囊中发生“原始”红细胞生成,逐渐被胎儿肝脏(Fetal Liver, FL)和出生后骨髓(Bone Marrow, BM)中的“终末”红细胞生成取代。在人类胎儿发展过程中,FL 是关键的红细胞生成器官,但目前对人类 FL 红细胞生成的认识非常有限。本文的研究目的在于综合特征和全球转录组分析人类胎儿肝脏终末红细胞生成,探讨红细胞生成过程中的基因表达模式,并进一步理解培养系统对基因表达的影响。 研究来源 本文由Yongshuai Han, Shihui Wang, Yaomei Wang, Yumin Huang, Chengjie Gao, Xinhua Guo,...

探讨弓形虫蛋白乳酸化与代谢调控

蛋白质乳酸化和代谢调控的研究揭示了弓形虫Toxoplasma gondii生物学的全新领域 背景介绍: 弓形虫 (Toxoplasma gondii) 是一种全球分布的原生动物寄生虫,感染了超过30%的人口。弓形虫可引起弓形虫病 (toxoplasmosis),这是广泛传播的一种人畜共患病。该寄生虫具有复杂的生活周期,包含有性和无性阶段,主要存在于终末宿主猫科动物和中间宿主(温血动物)的组织中。弓形虫在免疫力低下的个体和发育中的胎儿中能造成严重甚至致命的症状。尽管现有的治疗药物,如阿奇霉素、乙胺嘧啶和螺旋霉素等,能抑制弓形虫的某些活动,但它们通常只对快速复制的速殖子 (tachyzoites) 有效,对缓慢增殖的缓殖子 (bradyzoites) 基本无效,且常伴有宿主细胞毒性。因此,进一步...

基于序列的功能性宏基因组学揭示环境微生物组中COPA基因的天然多样性

基于序列的功能宏基因组学揭示了环境微生物组中功能性COPA基因的新自然多样性 环境微生物组中的功能基因/蛋白质的自然多样性是进化和生物工程研究的重要组成部分。为了深入了解全球微生物中铜(Cu)抗性基因COPA的多样性,本研究采用了一种基于序列的功能宏基因组学方法。这项研究不仅将宏基因组组装技术、局部BLAST、进化迹分析(ETA)、化学合成和传统功能基因组学结合起来,还成功地高效挖掘了环境DNA(eDNA)中的COPA基因多样性。 研究背景 微生物进化过程中产生了多样的功能基因/蛋白质,这些基因/蛋白质在领域如微生物系统发育学和蛋白质工程中有着广泛的应用。例如,DNA指导的RNA聚合酶亚基Beta(RPB)和氮化酶铁蛋白(NIFH)等基因广泛用于识别和描述不可培养的‘黑暗物质’。现有已知功能...

使用单细胞组学技术解码人体生物学和疾病

解码人类生物学和疾病的单细胞组学技术 背景介绍 细胞是生命的基本单位,一个单独的受精卵可以发育成整个复杂的人体,由大约37万亿个细胞组成,这些细胞组织成各种不同的组织、器官和系统。传统的细胞分类方法主要依据细胞形态、位置或少数几种蛋白的表达水平,这种方法忽略了细胞间在其他分子层面的差异。细胞的高度异质性决定了人类生物学的功能多样性。不仅仅是细胞本身的状态、大小或祖源,细胞周围的特殊环境以及与相邻或远处细胞的交互也影响细胞特性。传统的大样本测序技术如RNA测序,隐藏了细胞的多样性,因为它对实验样本内所有细胞的基因表达进行了平均测量。因此,以单细胞分辨率理解人类生物学和疾病非常重要。 论文来源 本文由来自北京大学生命科学学院(Biomedical Pioneering Innovation Ce...

脓毒症相关肝功能障碍中的时间依赖性多组学整合

Time-Dependent Multi-Omics Integration in Sepsis-Associated Liver Dysfunction 引言 败血症,特别是严重病例,因全身感染引起多器官功能障碍,全球每年有多达500万人死于败血症。传统上,败血症相关的肝功能障碍(Sepsis-Associated Liver Dysfunction, SALD)被认为是伴随黄疸和高胆红素血症的病症。随着研究的深入,发现肝功能障碍在败血症过程的早期就会发生,但目前没有针对该病的特效治疗。 近年来,多组学技术(Multi-Omics Technologies)迅速发展,如基因组学、转录组学、蛋白质组学和代谢组学,显著推动了个性化医学的发展。然而,单一组学分析往往只能提供生物复杂性中的一个层次...

蛋白质结构预测:挑战、进展与研究范式的转变

蛋白质结构预测:挑战、进展及研究范式的变化 蛋白质结构预测是一个吸引了生物化学、医学、物理学、数学和计算机科学等多个领域研究者的重要跨学科研究课题。研究者们采取了多种研究范式去解决同一个结构预测问题:生物化学家和物理学家试图揭示蛋白质折叠的原理;数学家,尤其是统计学家,通常从假设给定目标序列的蛋白质结构概率分布开始,然后找到最可能的结构;而计算机科学家将蛋白质结构预测视为一个优化问题——寻找具有最低能量的结构构象或最小化预测结构与天然结构之间的差异。最近,深度学习在蛋白质结构预测中也取得了巨大成功。在这篇综述中,本文呈现了一项对蛋白质结构预测努力的调查。我们比较了不同领域研究者采用的研究范式,重点是深度学习时代研究范式的转变。 作者简介及论文出处 本文由Bin Huang, Lupeng K...

早期哺乳动物发育中细胞命运决定的分子机制综述

细胞命运决定机制的组学观点 背景介绍 在哺乳动物早期胚胎发育过程中,一个全能的合子(zygote)经过数次细胞分裂和两轮细胞命运决定(cell fate determination),最终形成成熟的囊胚(blastocyst)。在此过程中,随着胚胎的压缩,顶-基细胞极性(apicobasal cell polarity)的确立破坏了胚胎的对称性并指导了后续的细胞命运选择。内细胞团(inner cell mass,ICM)和滋养外胚层(trophectoderm, TE)的谱系分离是细胞分化的第一个标志,但一些分子已被证明在更早的阶段(如2-细胞和4-细胞阶段)通过细胞间的变异(inter-cellular variations)偏向早期细胞命运。 揭示早期细胞命运决定的机制已成为一个重要的研...

汉族人全基因组测序:从端粒到端粒

T2T-YAO:汉族全长双倍体参考基因组的组装实现 科学背景 人类基因组计划(Human Genome Project, HGP)自发起三十年以来,生物医学研究领域设定了一个长期目标,即构建完整而精确的人类参考基因组。然而,受限于测序技术的局限性,长期以来难以达到这个目标所需的全面性和精确度。近年来,随着测序技术的突破,T2T(Telomere-to-Telomere,端粒到端粒)项目公布了第一个全长单倍体人类基因组,即T2T-CHM13v1.1。这一成果填补了8%先前未知的高重复区域,使基因组质量达到了Q73.94,即每24.8兆碱基一次错误。 然而,即使这一成就令人振奋,T2T-CHM13基因组并不是真实人类个体的代表,而是源于一个缺失Y染色体的完全葡萄胎(CHM)细胞系的单倍体基因组。...